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摘要:本发明公开了一种通过尿液无创检测膀胱癌的方法。本发明通过检测尿液脱落细胞经纳米材料孵育后催化反应产生的压力信号,制备膀胱癌检测试剂盒检测膀胱癌。本发明发现膀胱癌患者尿液脱落肿瘤细胞膜表面的叶酸受体高表达,利用尿液脱落肿瘤细胞膜表面叶酸受体高表达的特性,其可以孵育结合上纳米材料并催化H2O2分解生成O2而产生压力信号,并通过检测试剂盒检测压力信号的大小来判断膀胱癌肿瘤细胞的存在,以此来无创检测膀胱癌。本发明通过对尿液脱落细胞经纳米材料孵育后催化反应产生的压力信号进行检测,结果判断简单快速、明确且经济、阳性检出率较高,为膀胱癌的检测提供了一种新的无创且灵敏度高的检测方法。
主权项:1.一种通过尿液无创检测膀胱癌的方法,其特征在于:该方法通过以下检测试剂盒和检测方法完成:检测试剂盒:包括主体盒,主体盒内底端设有放样凹槽,放样凹槽内设置放样瓶,放样瓶上部设有压力计,压力计下方设置测压探针,主体盒左侧设置激光发射器,激光发射器的激光探头正对放样瓶,主体盒右侧设有温度调节器,主体盒前端设置进样窗口;检测方法:(1)离心待测尿液样品,高速离心提取尿液脱落细胞;将纳米材料Ag-AgCl@Au-S-PFG-FA加入至尿液脱落细胞并混匀,后置于37℃恒温培养箱内孵育0.8~1.2小时;(2)孵育完成后进行高速离心,弃上清液,提取孵育后结合纳米材料的尿液脱落细胞,用PBS清洗后再次高速离心,弃上清液,提取洗涤后结合纳米材料的尿液脱落细胞;通过两次高速离心及PBS清洗除去未结合尿液脱落细胞的纳米材料;(3)打开主体盒内的压力计、温度调节器和激光发射器预热,将主体盒的温度调控至35~38℃;(4)将H2O2、NaOH溶液及孵育洗涤后结合纳米材料的尿液脱落细胞加入放样瓶中混匀,迅速盖上密封瓶盖进行密封;(5)将密封后的放样瓶通过主体盒前端的进样窗口迅速转移至预热后的主体盒内部的放样凹槽内,并将压力计的测压探针通过密封瓶盖迅速插入放样瓶内,进行压力信号的检测;(6)记录检测10分钟后的压力信号数值,高于或等于5.6kPa判断为“膀胱癌”,低于5.6kPa则判断为“非膀胱癌”。
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