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一种橘柄蔓绿绒组织培养方法 

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摘要:本发明公开了一种橘柄蔓绿绒的组织培养方法,包括如下步骤:获取并处理外植体;外植体接种到接种培养基中培养至顶芽萌发并抽长,启动诱导培养,接种在增殖培养基中培养,然后接种到过渡培养基中进行过渡培养,必要时进行生根培养。本发明的优点包括:培养周期短,且能够保证成苗率和生根率,能够获得株高2‑2.5cm,冠幅2.5‑3.5cm,叶长1.2‑1.8cm,叶宽0.8‑1.2cm,叶片3片以上,根长1.5‑2.5cm,根数2根以上的合格组培苗,产能可以满足市场需求。

主权项:1.一种橘柄蔓绿绒的组织培养方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)获取并处理外植体;(2)外植体接种到接种培养基中培养至顶芽萌发并抽长,接种培养基:MS、0.5-1mgLBA、0-0.01mgLNAA、30gL蔗糖、7gL卡拉胶,pH=6;(3)启动诱导培养,切下顶芽接种到启动诱导培养基中培养,启动诱导培养基成分:MS、1.0mgLBA、0.01mgLNAA、30gL蔗糖、7gL卡拉胶,pH=6;(4)将步骤(3)得到的团块芽切割,接种在增殖培养基中,增殖培养基:MS、0.5-1.0mgLBA、0.01mgLNAA、30gL蔗糖、7gL卡拉胶,pH=6;(5)将步骤(4)获得的增殖苗进行切割,然后接种到过渡培养基中进行过渡培养,第一次过渡培养的培养基是MS、0.2gLAC、30gL蔗糖,6gL卡拉胶,pH值6.0-6.2;第二次过渡培养的培养基是:MS、0.01mgLNAA、0.2gLAC、30gL蔗糖,6gL卡拉胶,pH值6.0-6.2,或,MS、0.1mgLNAA,30gL蔗糖,6gL卡拉胶,pH值6.0-6.2,或,MS、0.5mgLIBA,30gL蔗糖,6gL卡拉胶,pH值6.0-6.2;所述步骤(5)的过程包括:将步骤(4)得到的增殖苗去除底部愈伤组织,去掉枯黄叶片,小芽以3-4个芽的团块形式将组培苗进行分割,不去顶,接种至准备好的培养基中进行过渡培养;大芽以单株形式接种至准备好的培养基中进行过渡培养,培养要求如下:培养条件:25℃,光照3000LX,12h光12h暗;转接周期:40天;(6)挑选步骤(5)得到的达成苗标准的过渡苗,接种在生根培养基中生根培养,生根培养基:MS、0.01mgLNAA、0.2gLAC、30gL蔗糖,6gL卡拉胶,pH值6.0-6.2,或,MS、0.1mgLNAA、30gL蔗糖,6gL卡拉胶,pH值6.0-6.2,或,MS、0.1mgLNAA、0.2mgLAC、30gL蔗糖,6gL卡拉胶,pH值6.0-6.2。

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