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摘要:本发明涉及肿瘤治疗术领域,涉及一种植物类抑制肿瘤靶向多肽制剂及其制备方法。本发明提供了本发明首次从黄芪根中分离和纯化得到2种具有靶向结合并抑制PD‑L1的活性多肽,所述活性多肽具有广谱的抗肿瘤活性,能有效抑制肿瘤细胞增殖,且具备良好的生物学相容性,具备较大的应用前景。
主权项:1.一种植物类抑制肿瘤靶向多肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1备料:将黄芪根清洗干净后,切成碎块,常温风吹干备用;2物理粉碎:将步骤1黄芪根碎块放入破壁机进行粉碎至细颗粒状;3将步骤2得到的黄芪粉进行超临界CO2萃取处理,萃取时间6-12h,得到脱脂黄芪粉;4将步骤3得到的脱脂黄芪粉与水按照重量比1:10-20混合均匀,调节pH值为8.5-10.5,升温至50-70℃后,辅以超声微波处理,微波时间10-20min,过滤,收集过滤液;5复合酶解:将步骤4)的过滤液加入终浓度为20-50%的复合蛋白酶,持续搅拌酶解5-10h,并升温至95-100℃恒温10-15min灭酶,随后离心分离上清液得到黄芪酶解液;6过滤浓缩:向步骤5)黄芪酶解液采用超滤膜过滤,截留分子量在4000-5000Da多肽分子;将过滤后的黄芪多肽真空浓缩至浓度为10-18°Bé,制得黄芪多肽浓缩液;7黄芪多肽鉴定:取步骤6)黄芪多肽浓缩液进行测序处理;8黄芪多肽纯度鉴定:将黄芪多肽浓缩液转移至喷雾干燥机,进风温度90-100℃,出风温度70-80℃进行干燥至黄芪多肽干粉含水质量不大于5%,收集干粉,即制得黄芪多肽。
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