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检测嗜冷黄杆菌的多重PCR引物对组合及其应用 

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摘要:本发明公开了检测嗜冷黄杆菌的多重PCR引物对组合及其应用,涉及分子生物学技术领域。本发明首先通过高通量测序技术获得嗜冷黄杆菌全基因组序列,将全基因组序列在NCBI数据库中逐一对比,找到与其他基因组完全不匹配的特异性序列,根据特异性序列设计特异性引物,并通过其他菌株检测引物的特异性,最终筛选到特异性高的引物。之后设计了嗜冷黄杆菌多重PCR引物对组合并利用其进行多重PCR检测,结果显示,本发明设计并筛选得到的多重PCR引物对组合对于检测目标嗜冷黄杆菌具备良好的扩增效果,采用其进行嗜冷黄杆菌检测具有显著特异性和较高的检测灵敏度。

主权项:1.一种检测嗜冷黄杆菌Flavobacteriumpsychrophilum的特异性PCR引物对,其特征在于,所述特异性PCR引物对为FP88-FR、FP995-FR、FP1024-FR、FP90-FR、2FP90-FR或2FP1022-FR;所述FP88-FR包括核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的上游引物和核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的下游引物;所述FP995-FR包括核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的上游引物和核苷酸序列如SEQIDNO.4所示的下游引物;所述FP1024-FR包括核苷酸序列如SEQIDNO.5所示的上游引物和核苷酸序列如SEQIDNO.6所示的下游引物;所述FP90-FR包括核苷酸序列如SEQIDNO.7所示的上游引物和核苷酸序列如SEQIDNO.8所示的下游引物;所述2FP90-FR包括核苷酸序列如SEQIDNO.9所示的上游引物和核苷酸序列如SEQIDNO.10所示的下游引物;所述2FP1022-FR包括核苷酸序列如SEQIDNO.11所示的上游引物和核苷酸序列如SEQIDNO.12所示的下游引物。

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百度查询: 江苏省淡水水产研究所 检测嗜冷黄杆菌的多重PCR引物对组合及其应用

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