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申请/专利权人：唐春艳;陈素云

摘要：本发明公开了一种米槠组培苗生根诱导方法，选取经常规组培中壮芽培养35～40d的米槠继代芽，经过消毒修剪后先进行预生根培养，经过30～35d预生根培养后再进行生根培养，置于温度20±1℃，湿度55～70%，光照强度2000～2500lux，光照15～16hd的环境中培养，获得带根组培苗。本发明缩短了米槠继代芽生根周期，生根率高，根系多，质量好，生根组培苗移栽成活率高，可实现米槠组培产业化育苗，为人工无性系林的建设提供优质种苗，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。

主权项：一种米槠组培苗生根诱导方法，其特征在于：选取增殖继代米槠小苗，先进行预生根培养，然后再进行生根培养，置于适宜环境中培养，获得带根组培苗，主要操作步骤如下：（1）取材：选取经常规组培中壮芽培养35～40d的米槠继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度1～2cm的单芽，于节下2～3mm处剪切，清除基部叶片和叶柄，备用；（2）预生根培养：将步骤（1）修剪后的单芽接种于预生根培养基中,在特定的光温环境中进行预生根培养；（3）生根培养：待步骤（2）中的单芽经过30～35d预生根培养后，将单芽转接入生根培养基，在特定的光温环境中进行生根培养。

全文数据：一种米槠组培苗生根诱导方法技术领域[0001]本发明属于米槠无性繁殖技术，涉及一种米槠组培苗生根诱导方法。背景技术小，叶披针形，叶全缘，或兼有少数浅裂齿，嫩叶叶背有红褐色或棕黄色稍紧贴的细片状蜡鳞层，成长叶呈银灰色或多少带灰白色;雄圆锥花序近顶生，花序轴无毛或近无毛，果序无毛，壳斗近圆球形或阔卵形，坚果近圆球形或阔圆锥形，熟透时无毛，果胳位于坚果底部。3一6月开花，次年9-11月结果成熟。产中国长江以南各地。生于山地或丘陵常绿或落叶阔叶混交林中。喜雨量充沛和温暖气候，能耐荫，喜深厚、温润之中性和酸性土，亦耐千旱和贫瘠。既是优^的用材树种，又是培育食用菌的优良原料，培肥土壤、涵养水源能力都比较强。米槠树形高大、美观，叶椭圆或长圆形。早期生长迅速，适应能力强，抗风力强，又耐烟尘、抗污染并能杀菌。在庭院观赏及营造防火林带中有着广阔的应用前景和发展潜力。[0003]米槠一般都采用种子繁殖，造林时多采用裸根苗造林。在自然条件比较恶劣的栽植地，苗木生长期长、成活率低下，从而影响到造林成果。组织培养技术是一种快速无性繁殖技术，选择米槠优良家系或者无性系为材料，通过组织培养方法繁殖苗木，既可以满足生产上的数量要求，又可保持母本性状。然而在组培过程中，常常出现生根率低、生根不统一、根系数量少以及根系不粗壮的问题。发明内容[0004]本发明的目的在于提供一种能提高米槠组培苗的生根率，根系数量以及根系萌发整齐度的米槠组培苗生根诱导方法。[0005]为了实现上述发明目的，本发明的技术方案如下：一种米槠组培苗生根诱导方法，选取增殖继代米槠小苗，先进行预生根培养，然后再进行生根培养，置于适宜环境中培养，获得带根组培苗，主要操作步骤如下：1取材:选取经常规组培中壮芽培养35〜40d的米槠继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度1〜2cm的单芽，于节下2〜3mm处剪切，清除基部叶片和叶柄，备用；2预生根培养:将步骤1修剪后的单芽接种于预生根培养基中，在特定的光温环境中进行预生根培养；3生根培养:待步骤2中的单芽经过30〜35d预生根培养后，将单芽转接入生根培养基，在特定的光温环境中进行生根培养。[0006]以上所述的预生根培养基其原料含量为：12改良ER培养基+NAA1.0-2.011^1+维生素C6gL++VC1.0〜2_0mgL+卡拉胶25gL+琼脂5.0gL。[0007]以上所述的生根培养基其原料含量为：12改良ER培养基+IAA1.0〜2.0mgL+ABT2#0•5〜2•0mgL+蔗糖25gL+琼脂5•OgL。[0008]以上所述的改良ER培养基的配方为：NH4NO3980mgL+KN〇31120mgL+CaCl2_2H2〇440mgL+MgS〇4..7H2〇310mgL+KH2PO4340mgL+H3BO3〇.63mgL+MnS〇4..4H2〇22.3mgL+ZnS〇4.4H2〇8.64H2〇mgL+Na2Mo〇4.H2〇〇.〇25mgL+CuS〇4..5H2〇0.0025mgL+C0CI2.6H2O0.0025mgL+FeS0427.8mgL+NaEDTA37.3mgL+肌醇80mgL+烟酸0_5mgL+盐酸吡哆醇0_5mgL+甘氨酸2mgL。[OOO9]以上步骤2和步骤3所述的光温环境为:温度20±1°C，湿度55〜70%，光照强度2000〜25001ux，光照15〜16hd。[0010]本发明具有的优点及有益效果如下：1、本发明采用I2改良ER培养基作为基本培养基，同时重点调整了与米槠生根的相关的微量元素和有机成分，使得培养基更科学，更有针对性，更易促使米槠继代芽生根，效果显著。[0011]2、本发明在生根诱导前采用低浓度NAA和抗坏血酸VC对继代单芽进行预生根培养，然后再进行生根培养，可使组培苗发根统一，发根速度快，根系粗壮且数量较多。[0012]3、本发明在增殖继代单芽经过30〜35d时间预生根培养后转入生根培养，即可达到预生根培养效果，又避免了小苗在预生根培养阶段长出根系而使后期生根培养发根不整齐。[0013]4、本发明的在特定的光温条件下进行预生根和生根培养，适应米槠组培苗的生长特性，促进苗木的生长。[0014]5、本发明缩短了米槠继代芽生根周期，生根率高，根系多，质量好，生根组培苗移栽成活率高，可实现米槠组培产业化育苗，为人工无性系林的建设提供优质种苗，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。具体实施方式[0015]下面结合实施例对本发明作进一步说明。[0016]实施例1:选取经常规组培中壮芽培养35〜40d的米槠继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度1〜2cm的单芽，于节下2〜3mm处剪切，清除基部叶片和叶柄。将修剪后的单芽接种于预生根培养基中，所述的预生根培养基其原料含量为：12改良ER培养基+NAA1.0mgL+维生素C6gL++VC2.0mgL+卡拉胶25gL+琼脂5.^几，在温度20±11，湿度55〜60%，光照强度200011^，光照16匕£1的环境中进行预生根培养。待单芽经过30〜35d预生根培养后，将单芽转接入生根培养基，所述的生根培养基其原料含量为：12改良ER培养基+IAA1.0mgL+ABT2#0.5mgL+鹿糖25gL+琼脂5.0gL，在温度20±1°C，湿度55〜60%，光照强度20001ux，光照16hd环境中进行生根培养。培养15-20d，90%以上的单芽长出根系。[0017]以上所述的改良ER培养基的配方为：NH4N〇3980mgL+KN031120mgL+CaCl2.2H2〇440mgL+MgS〇4..7H20310mgL+KH2PO4340mgL+H3BO30_63mgL+MnS〇4..4H2〇22.3mgL+ZnS04.4H208.64H20mgL+Na2Mo〇4.H2〇0.025mgL+CuS〇4..5H200.0025mgL+C0CI2.6H2O0.0025mgL+FeS0427.8mgL+NaEDTA37.3mgL+肌醇8〇mgL+烟酸〇.5mgL+盐酸吡哆醇0.5mgL+甘氨酸2mgL。[0018]实施例2:选取经常规组培中壮芽培养35〜40d的米槠继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度1〜2cm的单芽，于节下2〜3mm处剪切，清除基部叶片和叶柄。将修剪后的单芽接种于预生根培养基中，所述的预生根培养基其原料含量为：12改良ER培养基+NAA1.5mgL+维生素C6gL++VC1.0mgL+卡拉胶25gL+琼脂5.0gL，在温度2〇±rC，湿度60〜65%，光照强度20001UX，光照15hd的环境中进行预生根培养。待单芽经过30〜35d预生根培养后，将单芽转接入生根培养基，所述的生根培养基其原料含量为：I2改良ER培养基+IAA1•5mgL+ABT2#l•0mgL+蔗糖25gL+琼脂5.OgL，在温度20±1°C，湿度60〜65%，光照强度20001ux，光照15hd的环境中进行生根培养。培养15-20d，90%以上的单芽长出根系。[0019]以上所述的改良ER培养基的配方为：NH4NO3980mgL+KN〇31120mgL+CaCl2.2H20440mgL+MgS04..7H20310mgL+KH2PO4340mgL+H3BO30.63mgL+MnS04..4H2022.3mgL+ZnS04.4H208.64H20mgL+Na2Mo〇4.H200.025mgL+CuS〇4..5H2〇0.0025mgL+C0CI2.6H2O0.0025mgL+FeS0427.8mgL+NaEDTA37.3mgL+肌醇80mgL+烟酸0.5mgL+盐酸卩比卩多醇0.5mgL+甘氨酸2mgL。[0020]实施例3:选取经常规组培中壮芽培养35〜40d的米槠继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度1〜2cm的单芽，于节下2〜3mm处剪切，清除基部叶片和叶柄。将修剪后的单芽接种于预生根培养基中，所述的预生根培养基其原料含量为：12改良ER培养基+NAA2.0mgL+维生素C6gL++VC1.5mgL+卡拉胶25gL+琼脂5.0gL，在温度20±1。：，湿度65〜70%，光照强度25001UX，光照15hd的环境中进行预生根培养。待单芽经过3〇〜35d预生根培养后，将单芽转接入生根培养基，所述的生根培养基其原料含量为：I2改良ER培养基+IAA2•0mgL+ABT2#2•0mgL+蔗糖25gL+琼脂5•OgL，在温度20±1°C，湿度65〜70%，光照强度25001UX，光照15hd的环境中进行生根培养。培养15-20d，90%以上的单芽长出根系。[0021]以上所述的改良ER培养基的配方为：NH4N03980mgL+KN031120mgL+CaCl2.2H20440mgL+MgS〇4..7H20310mgL+KH2PO4340mgL+H3BO30_63mgL+MnS〇4..4H2〇22.3mgL+ZnS04.4H208.64H20mgL+Na2Mo〇4.H200.025mgL+CuS〇4..5H200.0025mgL+C0CI2.6H2O0.0025mgL+FeS〇427.8mgL+NaEDTA37.3mgL+肌醇80mgL+烟酸0.5mgL+盐酸吡哆醇0.5mgL+甘氨酸2mgL。

权利要求：1.一种米槠组培苗生根诱导方法，其特征在于:选取增殖继代米槠小苗，先进行预生根培养，然后再进行生根培养，置于适宜环境中培养，获得带根组培苗，主要操作步骤如下：1取材:选取经常规组培中壮芽培养35〜40d的米槠继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度1〜2cm的单芽，于节下2〜3mm处剪切，清除基部叶片和叶柄，备用；2预生根培养:将步骤（1修剪后的单芽接种于预生根培养基中，在特定的光温环境中进行预生根培养；3生根培养:待步骤2中的单芽经过30〜35d预生根培养后，将单芽转接入生根培养基，在特定的光温环境中进行生根培养。2.根据权利要求1所述的一种米槠组培苗生根诱导方法，其特征在于:所述的预生根培养基其原料含里为：12改良ER培养基+NAA1.0〜2.0mgL+维生素C6gL++VC1.0〜2.0mgL+卡拉胶25gL+琼脂5.0gL。3.根据权利要求1所述的一种米槠组培苗生根诱导方法，其特征在于:所述的生根培养基其原料含量为：12改良ER培养基+IM1.0〜2.0mgL+ABT2#0.5〜2.0mgL+蔗糖25gL+琼脂5.0gL。4.根据权利要求2或3任一所述的一种米槠组培苗生根诱导方法，其特征在于：所述的改良ER培养基的配方为：NH4N〇3980mgL+KN〇31120mgL+CaCl2.2H2〇440mgL+MgS04._7H2〇310mgL+KH2PO4340mgL+H3BO30_63mgL+MnS〇4..4H2〇22.3mgL+ZnS04.4H208.64H20mgL+Na2Mo〇4.H200.025mgL+CuS04..5H200.0025mgL+C〇C12_6H200_0025mgL+FeS0427.8mgL+NaEDTA37.3mgL+肌醇80mgL+烟酸0.5mgL+盐酸吡哆醇〇.5mgL+甘氨酸2mgL。5.根据权利要求1所述的一种米槠组培苗生根诱导方法，其特征在于:步骤2和步骤3所述的光温环境为：温度20±rc，湿度55〜7〇%，光照强度2000〜25001UX，光照15〜16hd〇

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