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申请/专利权人:华中农业大学
摘要:本发明公开了一种利用5SrRNA鉴定鱼类早期发育阶段生理性别的方法,步骤是:1利用总RNA提取试剂盒或TRIzol试剂常规提取动物细胞总RNA的方法,提取鱼类性腺组织总RNA,利用核酸分析仪测定OD260280值,判断RNA纯度;利用琼脂糖凝胶电泳法分离总RNA,观察5SrRNA,18SrRNA和28SrRNA的亮度和分布;2将提取的性腺总RNA进行微毛细管电泳,根据核酸分析软件所得出的RNA类型覆盖区域面积大小,计算其中5SrRNA占总RNA的比例;3根据5SrRNA占总RNA比例判断鱼类早期发育阶段的生理型雌雄,其中5SrRNA比例小于或等于9.0%时判断为精巢组织,5SrRNA比例大于或等于12%时判断为卵巢组织。方法易行,操作简便,在12小时以内实现了100尾以上鱼类个体的生理型性别鉴定,确定了鱼类生理性别。
主权项:1.一种利用5SrRNA鉴定鱼类早期发育阶段生理性别的方法,其步骤是:1利用总RNA提取试剂盒或TRIzol试剂常规提取动物细胞总RNA的方法,提取鱼类性腺组织总RNA,利用核酸分析仪测定OD260280值,判断RNA纯度;利用琼脂糖凝胶电泳法分离总RNA,观察5SrRNA,18SrRNA和28SrRNA的亮度和分布,所述的5SrRNA的大小在130~150个核苷酸之间,其在微毛细管电泳的峰值通常在接近140nt的位置,总RNA的值指所有覆盖区域所产生的面积大小;2将提取的性腺总RNA进行微毛细管电泳,根据核酸分析软件所得出的RNA类型覆盖区域面积大小,计算其中5SrRNA占总RNA的比例;3根据5SrRNA占总RNA比例判断鱼类早期发育阶段的生理型雌雄,其中5SrRNA比例小于或等于9.0%时判断为精巢组织,5SrRNA比例大于或等于12%时判断为卵巢组织。
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