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申请/专利权人：郑州轻工业大学
摘要：本发明属于传感器领域，涉及胰岛素的检测，特别是指基于MEF效应二次放大INS信号的适体传感器及其制备方法和应用。基于MEF效应，构建了用于检测INS的AuNPs@PloyAn‑aptamer@Cy3‑DNA荧光增强型适体传感器。该传感器通过双链DNA提供的刚性结构实现荧光增强，并利用核酸适体可与靶目标特异性结合的实现了荧光信号的二次放大，对血清中的INS实现了较低浓度检测。本发明所构建的荧光适体传感器在检测真实人体血清中的胰岛素方面具有很高的重复性，且具有很高的精密性，可用于实际复杂生物样品中的INS检测。
主权项：1.基于MEF效应二次放大INS（胰岛素）信号的适体传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：（1）将超纯水加入INS核酸适体激活，配制成一定浓度的INS核酸适体溶液；其中INS核酸适体的序列为5’-SH-AnGGTGGTGGGGGGGGTTGGTAGGGTGTCTTC-3’，其中n=12-30，n为自然数；其中INS核酸适体溶液的浓度为5μmolL；（2）将步骤（1）的INS核酸适体溶液与AuNPs混合，加入PBS缓冲液，振荡培养2h，再加入二水柠檬酸三钠溶液，振荡培养2h，离心去除一半上清液，得溶液Ⅰ；其中INS核酸适体溶液、AuNPs、PBS缓冲液和二水柠檬酸三钠溶液的体积比为90:45:45:4，其中AuNPs的浓度为1nmolL，PBS缓冲液的浓度为10mmolL，二水柠檬酸三钠溶液的浓度为500mmolL；（3）向溶液Ⅰ中加入Cy3-DNA溶液，定容后，恒温培养12h，即得适体传感器工作溶液；其中Cy3-DNA溶液与INS核酸适体溶液的体积比为1:1，Cy3-DNA的序列为5’-GAAGACACCCTACCAACCCCCCCCACCACC-3’，Cy3-DNA溶液的浓度为5μmolL。
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权利要求：
百度查询： 郑州轻工业大学 基于MEF效应二次放大INS信号的适体传感器及其制备方法和应用
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