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摘要:本发明公开了一种尖顶夭命藓的组织培养方法,包括尖顶夭命藓孢子作为外植体进行孢子萌发、配子体诱导与离体保存的步骤,其中:孢子萌发培养基配方为:MS+BA0.1‑1.0mg·L‑1、NAA0.1‑0.5mg·L‑1、蔗糖20‑30g·L‑1、琼脂3‑4g·L‑1,pH5.0‑5.8;配子体诱导和继代增殖培养基配方为:MS+BA0.2‑2.0mg·L‑1、NAA0.1‑1.0mg·L‑1、蔗糖20‑30g·L‑1、琼脂3‑4g·L‑1,pH5.0‑5.8;配子体离体保存培养基配方为:MS+BA0.1‑0.5mg·L‑1、IAA0.01‑0.05mg·L‑1、活性炭0.5‑2.0g·L‑1、蔗糖20‑30g·L‑1、琼脂3‑4g·L‑1,pH5.0‑5.8。该方法简单易操作,可实现尖顶夭命藓配子体的快速诱导、繁殖和长时间的离体保存。
主权项:1.一种尖顶夭命藓的组织培养方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一:孢子消毒,选取健康成熟的孢蒴,放入容器中,用0.2wt%的洗衣粉水浸泡5-12min后取出,刷洗表面,再用水冲洗干净后,放入无菌环境中,用75vt%的酒精浸泡40-80s后取出,再置于0.1wt%HgCl2中浸泡5-15min后取出,用无菌水漂洗5次,将孢蒴取出吸干水分,备用;步骤二:获得无菌原丝体,将上述步骤一所得孢蒴接种于初代诱导培养基中,光照培养,直至外植体上的孢子萌发,得无菌原丝体;所述初代诱导培养基配方为:MS+BA0.1-1.0mg·L-1、NAA0.1-0.5mg·L-1、蔗糖20-30g·L-1、琼脂3-4g·L-1,pH5.0-5.8;步骤三:配子体诱导,将上述步骤二所得无菌原丝体转入配子体诱导培养基中,光照培养,直至形成根茎叶分化的配子体植株;所述的原丝体配子体诱导培养基配方为:MS+BA0.2-2.0mg·L-1、NAA0.1-1.0mg·L-1、蔗糖20-30g·L-1、琼脂3-4g·L-1,pH5.0-5.8;步骤四:配子体离体保存,选取上述步骤三所得生长健壮的配子体,分离成小块,转入配子体离体保存培养基中进行保存;所述配子体离体保存培养基配方为:MS+BA0.1-0.5mg·L-1、IAA0.01-0.05mg·L-1、活性炭0.5-2.0g·L-1、蔗糖20-30g·L-1、琼脂3-4g·L-1,pH5.0-5.8。
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百度查询: 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 一种尖顶夭命藓的组织培养方法
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