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申请/专利权人:岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
摘要:本发明属于生物领域,公开了一种基于LAMP和CRISPR‑Cas12a的IBV快速检测方法,包括如下步骤:步骤1:通过LAMP引物组扩增鸡传染性支气管炎病毒的目标序列;步骤2:通过与目标序列匹配的crRNA、报告探针、Cas12a蛋白对目标序列进行二次检测,以判断鸡传染性支气管炎病毒是否存在靶序列;所述LAMP引物组为第一引物组、第二引物组、第三引物组中的至少一种;所述crRNA包括与第一引物组对应的第一crRNA、与第二引物组对应的第二crRNA、与第三引物组对应的第三crRNA。该方法能够针对IBV进行高灵敏、高特异性检测,提高对IBV检测的准确度,而且操作简单、快速、对仪器设备要求低。
主权项:1.一种基于LAMP和CRISPR-Cas12a的IBV快速检测方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1:通过LAMP引物组扩增鸡传染性支气管炎病毒的目标序列;步骤2:通过与目标序列匹配的crRNA、报告探针、Cas12a蛋白对目标序列进行二次检测,以判断样品中是否存在鸡传染性支气管炎病毒的靶序列;所述LAMP引物组为第一引物组、第二引物组、第三引物组中的至少一种;所述crRNA包括与第一引物组对应的第一crRNA、与第二引物组对应的第二crRNA、与第三引物组对应的第三crRNA;所述第一引物组包括如SEQIDNO.1~SEQIDNO.4所示的四条引物;所述第二引物组包括如SEQIDNO.5~SEQIDNO.8所示的四条引物;所述第三引物组包括如SEQIDNO.9~SEQIDNO.12所示的四条引物;所述第一crRNA的序列如SEQIDNO.13所示;所述第二crRNA的序列如SEQIDNO.14所示;所述第三crRNA的序列如SEQIDNO.15所示。
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