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申请/专利权人：四川大学
摘要：本发明公开了一种引物组、试剂盒、区分不同IBV疫苗毒株的多重PCR检测方法及其应用，区分不同IBV疫苗毒株的多重PCR检测方法包括如下步骤：根据H120型IBV、491型IBV、QX型IBV以及LDT3型IBV的核苷酸序列分别设计特异性引物组；核酸提取、cDNA的合成及重组质粒的制备；建立单重PCR扩增反应体系；建立多重PCR扩增反应体系；特异性好，检测速度快，灵敏度高，具有良好的应用前景。
主权项：1.一种区分LDT3型IBV疫苗、H120型IBV疫苗、491型IBV疫苗和QX型IBV疫苗的多重PCR检测方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：根据H120型IBV、491型IBV、QX型IBV以及LDT3型IBV的S1核苷酸序列分别设计引物组；S2：核酸提取、cDNA的合成及重组质粒的制备；S3：建立单重PCR扩增反应体系；S4：建立多重PCR扩增反应体系；所述引物组包括QX型特异性引物、491型特异性引物、H120型特异性引物以及LDT3型特异性引物；其中QX型特异性引物的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示，QX型特异性引物的下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示；491型特异性引物的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:3所示，491型特异性引物的下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示；H120型特异性引物的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示，H120型特异性引物的下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:6所示；LDT3型特异性引物的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:7所示，LDT3型特异性引物的下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO:8所示；所述多重PCR的退火温度为52.5℃；所述多重PCR中4组引物的浓度均为10μmolL；所述多重PCR的循环次数为35；所述检测方法为非诊断目的的检测方法。
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百度查询： 四川大学 引物组、试剂盒、区分不同IBV疫苗毒株的多重PCR检测方法及其应用
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