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申请/专利权人：中国农业科学院油料作物研究所;武汉中油大地希望种业有限公司

摘要：本发明公开了一种MLO基因突变体及其制备方法与应用，属于生物技术领域。本发明公开了一种利用基因编辑技术提高油菜菌核病抗性的方法，具体利用CRISPRCas9基因编辑技术对BnMLO6基因6个同源拷贝同时突变，获得稳定遗传的BnMLO6基因6个同源拷贝同时突变的材料简称为bnmlo6。田间和室内观察结果表明，油菜bnmlo6材料不仅表现出较强的白粉病抗性，而且也能提高油菜对菌核病的抗性。本发明首次报道了BnMLO6基因可以同时提高油菜对菌核病和白粉病的抗性，具有广阔的应用前景。

主权项：1.一种同时提高油菜抗菌核病和白粉病的突变MLO6基因，其特征在于，野生型MLO6基因包括6个同源拷贝，在油菜darmor基因组的命名分别为BnaA03g60240DMLO6-A03、BnaCnng04240DMLO6-C03、BnaA01g22680DMLO6-A01、BnaC01g29530DMLO6-C01、BnaA09g13700DMLO6-A09和BnaCnng31840DMLO6-C09，其对应的核苷酸序列分别为SEQIDNO.53-58所示，所述突变MLO6基因与野生型MLO6基因相比，MLO6-A03拷贝为纯合突变，MLO6-A03拷贝的两条链的位点1069到1083缺失了15个碱基，缺失的碱基为CTTGTTCAGCCCGGT；MLO6-C03拷贝为杂合突变，MLO6-C03拷贝的一条链的位点1069到1081缺失13个碱基，缺失的碱基为CTTGTTCAGCCCG，MLO6-C03拷贝的另一条链的位点1072和1073缺失2个碱基，缺失的碱基为GT；MLO6-A01拷贝为杂合突变，MLO6-A01拷贝的一条链的位点1096和1097缺失2个碱基TT，MLO6-A01拷贝的另一条链的位点1096插入单个碱基G；MLO6-C01拷贝的一条链的位点1070到1081缺失12个碱基，缺失的碱基为TTGTTCAGCCCG，另一条链和野生型一致；MLO6-A09拷贝的一条链的位点1066到1068缺失3个碱基，缺失的碱基为GTT，另一条链和野生型一致；MLO6-C09拷贝的一条链的位点1065和1066缺失2个碱基，缺失的碱基为TG，另一条链和野生型一致。

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