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申请/专利权人：北京化工大学

摘要：本发明公开了一种基于FEN1酶驱动的DNAWalker生物传感器用于荧光和电化学双模分析APE1酶的方法。以AuNPs为基础构造了一种金球体系，用正丁醇法将CP‑walker和带有FAM荧光基团修饰的轨道F与AuNPs混合以摩尔比为1000:1的比例修饰AuNPs，得到A‑C‑W‑F；A‑C‑W‑F与APE1酶混合，加入FEN1酶后得到检测APE1酶的荧光生物传感器；将10μL1μMH1溶液经TCEP活化后滴在金电极上称为H1GE；将H1GE用1mMMCH溶液中处理0.5h称为MCHH1GE；将荧光生物传感器滴在MCHH1GE上称为FlapMCHH1GE；将H2和H3滴到FlapMCHH1GE表面称为HCRFlapMCHH1GE；用MB孵育HCRFlapMCHH1GE30min，得到检测APE1酶的电化学生物传感器；把待测样品加入荧光和电化学分析检测APE1酶的生物传感器中，设定一样的检测条件，测得不同待测样品的荧光和电化学曲线，获得APE1酶的特异性检测结果。

主权项：1.一种基于FEN1酶驱动的DNAWalker生物传感用于荧光和电化学双模分析APE1酶，其特征在于，步骤为：1用正丁醇法，以巯基CP-walker、F与AuNPs摩尔比为1000:1的比例修饰AuNPs，离心清洗三次，溶于超纯水中得到A-C-W-F；2将步骤1得到的与A-C-W-F与TAEMg2+缓冲液、APE1酶混合，加入FEN1酶后得到检测APE1酶的生物传感器；3将10μL1μMH1溶液经TCEP活化后滴在金电极上称为H1GE4将步骤3得到的H1GE用超纯水洗涤并在N2中干燥后，用1mMMCH溶液中处理0.5h称为MCHH1GE；5将步骤2得到的荧光生物传感器滴在步骤4得到的MCHH1GE上称为FlapMCHH1GE；6将步骤5得到的FlapMCHH1GE用超纯水洗涤并在N2中干燥，将H2和H3滴到电极表面称为HCRFlapMCHH1GE；7将MB滴到步骤6得到的HCRFlapMCHH1GE表面孵育30min，得到检测APE1酶的电化学生物传感器；8将不同浓度的APE1酶加入荧光和电化学分析检测APE1的生物传感器中，测得不同浓度APE1酶检测的荧光和电化学曲线；9把待测样品加入步骤2和7得到的荧光和电化学分析检测APE1酶的生物传感器中，设定一样的检测条件，测得不同待测样品的荧光和电化学曲线，获得APE1酶的特异性检测结果。

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