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申请/专利权人:郑州大学
摘要:本发明属于电化学生物传感器领域,涉及CYFRA21‑1的灵敏检测,特别是基于DNAwalker与SDR的CYFRA21‑1无酶级联扩增检测方法和应用。通过结合熵驱动的DNAwalker与双输出Toehold介导SDR的无酶级联扩增检测策略,用于灵敏检测CYFRA21‑1的电化学生物传感器。DNAwalker的引入能够多次引发TMSDR,将单个目标物的输入转化为多个信号探针SP的输出,并被捕获至电极表面,产生显著增强的电化学信号,在提高TMSDR反应效率的同时提高传感器的灵敏度。
主权项:1.基于DNAwalker与SDR的CYFRA21-1无酶级联扩增检测方法,其特征在于,步骤如下:(1)分别配制底物链T1SP、燃料链FW及发夹探针HP的缓冲溶液;(2)向活化的MBs溶液中加入底物链T1SP的缓冲溶液,经振荡过夜反应后进行磁分离并反复洗涤,再加入PBS重悬得T1SPMBs悬浮液;(3)向步骤(2)的T1SPMBs悬浮液中加入待测样品、燃料链FW的缓冲溶液,经恒温振荡反应后进行磁分离,取上清液作为样品检测液;(4)金电极经食人鱼溶液预处理后,用氧化铝浆液进行抛光并超声清洗,再在H2SO4溶液中进行电化学清洗与活化,所得的金电极表面上滴加经TCEP还原的发夹探针HP的缓冲溶液,孵育后洗涤,再在MCH溶液中孵育得HP修饰的电极;(5)将步骤(3)的样品检测液滴加至步骤(4)HP修饰的电极表面进行反应,再进行电化学信号测定峰值电流,代入浓度与峰值电流之间的线性关系方程式即可检测待测样品中的CYFRA21-1。
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权利要求:
百度查询: 郑州大学 基于DNA walker与SDR的CYFRA21-1无酶级联扩增检测方法和应用
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