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申请/专利权人:南京大学
摘要:本发明公开了一种基于TNA分子的细胞内镁离子成像的方法。属于金属离子成像技术领域,具体步骤:体外筛选镁离子依赖的具有RNA切割活性的TNA分子;对筛选获得的TNA分子序列进行活性测试及截短分析;选择其中活性最高的TNA分子进行生物化学表征;将TNA分子切割体系构建为镁离子荧光传感器;在体外缓冲液中验证该荧光传感器的性能;将该传感器转染至细胞中进行体内镁离子的成像。本发明可以有效地在体外对不同浓度的镁离子进行荧光响应,检测限达到0.35mM,并且可在活细胞内对镁离子进行荧光成像,比利用天然核酸进行检测的方法更稳定,更耐核酸酶的降解,为分子生物学提供了新的工具。
主权项:1.一种基于TNA分子的细胞内镁离子成像的方法,其特征在于,其具体操作步骤如下:1、体外筛选镁离子依赖的具有RNA切割活性的TNA分子;将TNA分子切割体系构建为镁离子荧光传感器;所述TNA分子具体是指:通过截短实验和蛇毒磷酸二酯酶处理后,从而获得的活性最高的TNA分子,其序列如下所示:5’-GTAGGAGAGGTTATCGTTGGAGGGAGATGAGTGTAG-2’;2、在体外缓冲液中验证该荧光传感器的性能;3、将该传感器转染至细胞中进行体内镁离子的成像。
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百度查询: 南京大学 一种基于TNA分子的细胞内镁离子成像的方法
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