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一种山羊KCNJ15基因CNV标记辅助检测生长性状的方法及其专用试剂盒 

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申请/专利权人:河南省畜牧总站

摘要:本发明公开了一种山羊KCNJ15基因CNV标记辅助检测生长性状的方法及其专用试剂盒。以河南波槐山羊、槐山羊、贵州黑山羊、贵州白山羊和太行山羊基因组DNA为模板,利用qPCR技术分别对山羊个体KCNJ15基因的CNV区域和内参基因MC1R的部分片段进行扩增,最后利用2*2‑ΔΔCt判定个体的拷贝数变异类型,并将结果分为多拷贝型、缺失型和正常型。本发明可在DNA水平上检测与山羊生长性状密切相关的CNV标记,加快了山羊优良性能的选育进程,该方法简单、快速,便于推广应用。

主权项:1.一种检测山羊KCNJ15基因拷贝数变异的方法在山羊分子标记辅助选择育种中的应用,其特征在于:所述检测山羊KCNJ15基因拷贝数变异的方法包括以下步骤:以山羊基因组DNA为模板,以引物对P1以及引物对P2为引物,分别通过实时荧光定量PCR扩增位于KCNJ15基因参考基因组序列NC_030808.1的150479082位到150489041位的拷贝数变异区域以及作为内参的MC1R基因的部分片段,然后根据定量结果鉴定KCNJ15基因的拷贝数变异类型;所述引物对P1为:上游引物F1:5’-CCGCTTTCTTGTGAACTTCCAT-3’下游引物R1:5’-CTGTCACGTGTCCAGAAAGTAGA-3’所述引物对P2为:上游引物F2:5’-GGGCAGTCCCTTGACAAAGA-3’下游引物R2:5’-ATCTCCCCAGCCTCCTCATT-3’;所述拷贝数变异类型是根据2*2-ΔΔCt将定量结果分为的三类:多拷贝型,2*2-ΔΔCt2;缺失型,2*2-ΔΔCt2;正常型,2*2-ΔΔCt=2;在贵州黑山羊中,拷贝数变异位点与个体的管围具有显著的相关性,且正常型的个体优于多拷贝型的个体;在贵州白山羊中,拷贝数变异位点与个体的体重和胸围具有显著的相关性,且拷贝数为3的个体优于拷贝数为4、5的个体;在槐山羊中,拷贝数变异位点与个体的体斜长具有显著的相关性,且多拷贝型的个体优于正常型的个体;在太行山羊中,拷贝数变异位点与个体的体高和体重具有显著的相关性,且正常型的个体优于多拷贝型的个体。

全文数据:

权利要求:

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