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申请/专利权人：康立泰生物医药(青岛)有限公司
摘要：本发明提出一种NKT细胞体外扩增方法，属于细胞培养技术领域。该方法包括激活NKT细胞和扩增NKT细胞两个阶段，整个激活扩增过程中均以无血清培养基作为基础培养基，在此基础上添加适宜的细胞因子来进行激活扩增。本发明提供的扩增方法操作简单，成本低，且NKT细胞的扩增数量高、纯度高，具有较强的杀伤活性。
主权项：1.一种NKT细胞体外扩增方法，其特征在于，包括如下步骤：1第0天，用完全培养基重悬PBMC，在37℃，5％CO2静置培养；所述完全培养基是以无血清培养基作为基础培养基，添加500～2000UmL的IFN-γ和基础培养基体积5％的自体灭活血浆；2第1天，补加浓度为0.1～1μgmL的CD28抗体、0.1～1μgmL的CD3抗体、0.05～5ugmL的CD16抗体、500～5000UmL的IL-2和10～200ngmL的IL-7，在37℃，5％CO2继续培养；3在37℃，5％CO2继续培养至第7天，得到激活NKT细胞；其中，在该步骤的继续培养过程中补加两次含500～5000UmL的IL-2、10～200ngmL的IL-7及5％自体灭活血浆的无血清培养基；4第7天，将激活NKT细胞接种在扩增培养基中，并在扩增培养基中添加扩增培养基体积5％的自体灭活血浆，在37℃，5％CO2进行培养；所述扩增培养基以无血清培养基作为基础培养基，添加500～5000IUmLIL-2；5第14天后停止培养，收获NKT细胞。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 康立泰生物医药(青岛)有限公司 一种NKT细胞体外扩增方法
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