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摘要:本发明公开了一种NKT细胞的培养方法,制备培养基,培养基中含9%小牛血清、2mmolL谷氨酰胺、1x105UL青霉素、100mgL链霉素和50umolL巯基乙醇、1000UmLIFN‑γ,用RPMI1640调整至2×106个mL进行培养,抽取患者的外周血,通过Ficoll密度梯度离心分离单个核细胞,放入制备的培养基中,将培养基至于37℃和体积分数为6%的CO2培养箱中培养24h,本发明具有以下优点:培养基中加入不同的细胞因子IFN‑y、IL‑1、IL‑2、CD3McAb可刺激外周血单个核细胞培养诱导而成NKT细胞,同时表达CD3、CD56两种膜蛋白分子,使得NKT细胞增殖速度快。
主权项:1.一种NKT细胞的培养方法,其特征在于,包括以下操作步骤:步骤一:首先制备培养基,使得培养基中含9%小牛血清、2mmolL谷氨酰胺、1x105UL青霉素、100mgL链霉素和50umolL巯基乙醇、1000UmLIFN-γ,并用RPMI1640调整至2×106个mL进行培养;步骤二:抽取患者的外周血,通过Ficoll密度梯度离心分离单个核细胞,并放入步骤一中制备的培养基中,并将培养基至于37℃和体积分数为6%的CO2培养箱中培养24h;步骤三:并对步骤二中培养的NKT细胞扩增分析、NKT细胞表型分析、NKT细胞体外细胞毒活性检测。
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