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申请/专利权人：南京鼓楼医院
摘要：本发明涉及一种以炎症为特征的突发性聋小鼠模型的构建方法，包括如下步骤：1采用C57BL6小鼠，在小鼠听泡后下方与颞骨临近处打孔，暴露圆窗，在小鼠圆窗龛内注入胶原酶进行浸润，浸润后用明胶海绵将圆窗龛内残余胶原酶吸除；2取3μl浓度为5mgml的LPS溶液，先向圆窗龛内注入1μlLPS溶液，用明胶海绵填塞圆窗龛，然后再将余下的2μlLPS溶液注入明胶海绵内，注入完毕后逐层缝合肌肉和皮肤，待小鼠苏醒后放入笼中继续饲养；3术后第3天检测听性脑干反应阈值及耳蜗形态学观察。本发明提高了LPS经园窗膜到内耳外淋巴液的渗透率，避免了鼓膜穿刺方法导致的中耳腔感染，满足了研究发展的需求。
主权项：1.一种以炎症为特征的突发性聋小鼠模型的构建方法，其特征在于包括如下步骤：1）采用C57BL6小鼠，在小鼠听泡后下方与颞骨临近处打孔，暴露圆窗，在小鼠圆窗龛内注入胶原酶进行浸润，浸润后用明胶海绵将圆窗龛内残余胶原酶吸除；2）取3μl浓度为5mgml的脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）溶液，先向圆窗龛内注入1μlLPS溶液，用明胶海绵填塞圆窗龛，然后再将余下的2μlLPS溶液注入明胶海绵内，注入完毕后逐层缝合肌肉和皮肤，待小鼠苏醒后放入笼中继续饲养；3）术后第3天检测听性脑干反应阈值及耳蜗形态学观察：各频率平均听阈下降15dBHL以上，耳蜗形态发生炎症改变，毛细胞缺失，表明LPS诱导的突发性聋小鼠模型成功；步骤1）中，先用7号尖刀扩大打孔范围至直径1.5mm，可见到紧贴鼓室内侧壁纵向走行的镫骨动脉，在镫骨动脉后上方，可见一椭圆形骨性凹陷，即为圆窗龛所在位置，再用显微镊分离圆窗龛周围组织，使圆窗充分暴露；步骤1）中，通过微量吸液管抽取1μl浓度为30mgml的胶原酶I，再通过微量注射泵注入小鼠圆窗龛内；步骤1）中，胶原酶I放入小鼠圆窗龛的浸润时间为10分钟。
全文数据：
权利要求：
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