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舒缓曲目产生的音乐节律磁场对突触可塑性LTP调控的分析方法 

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申请/专利权人:天津工业大学

摘要:本文阐述了红粉舒缓曲目产生的音乐节律磁场对突触可塑性LTP调控的分析方法,选择了3首不同频率的红粉舒缓曲目和对应频率的3首纯净正弦曲目,曲目经外置声卡和功率放大器输出到线圈中,产生磁场强度为2mT的音乐节律磁场;实验中对离体海马脑片进行了2min的磁刺激,采用多电极阵列系统记录6种音乐节律磁场对Schaffer‑CA1突触后的场电位信号。实验发现,曲目1产生的音乐节律磁场对LTP增强调控效果最为明显;曲目1,2,3中的频率混叠效果导致其对LTP的调控弱于对应频率的曲目4,5,6产生的纯净正弦磁场;1500Hz的磁刺激是调控突触可塑性LTP增强和抑制转换的一个拐点频率。

主权项:1.舒缓曲目产生的音乐节律磁场对突触可塑性LTP调控的非治疗目的分析方法,其特征是:第1步、在产生具有音乐节律磁场和电生理记录装置设计上,主要由电脑、UR12外置声卡,LYB-2025功率放大器、XDS-1B正置显微镜、MEA2100-60多电极阵列和线圈组成;首先在电脑上通过AdobeAuditionCC2019音乐播放器输出音乐曲目,经UR12外置声卡将音乐曲目转换为模拟信号,模拟信号通过音频线接入到LYD-2025功率放大器后输出给线圈,产生满足实验要求的音乐节律磁场;线圈的外径为26.5mm,内径为16.5mm,高度为9.0mm,匝数为200,线圈材料选择直径为0.6mm的铜线;大脑切片位于线圈中心下方5mm处,通过调节LYB-2025功率放大器的输出电流为0.9A,在海马脑片上可以接收到强度为2mT的磁场;第2步、首先选择了3首不同频率的舒缓曲目:曲目1是莫扎特的经典曲目《土耳其进行曲》,曲目频率范围在3000~4000Hz;曲目2是贝多芬的经典曲目《月光奏鸣曲》,曲目频率范围在2000~3000Hz;曲目3是肖邦的经典曲目《葬礼进行曲》,曲目频率范围在1000~2000Hz;其次,取三首曲目的中间频率值,产生了三首纯净正弦曲目,分别为曲目4,频率为3500Hz,曲目5,频率为2500Hz,曲目6,频率为1500Hz;将六首曲目通过第1步设计的UR12外置声卡装置产生对应的音乐节律磁场,对海马脑片进行磁刺激,通过多电极阵列系统记录Schaffer-CA1突触后的场电位信号,每首曲目包含3组有效数据;第3步、曲目1,2,3产生的音乐节律磁场刺激2min后,记录到的LTP幅值相对于没有磁刺激的LTP的幅值分别增大了16.69%,14.50%,0.63%,从实验结果可知,曲目1和2产生的音乐节律磁场对LTP的幅值具有显著性增强作用,且随频率的升高而升高,但曲目3产生的节律磁场对LTP的增强效果不具有显著性差异;曲目4,5产生的音乐节律磁场刺激后,记录到的LTP幅值相对于没有磁刺激的LTP的幅值分别增大了27.54%和20.43%,但曲目6产生的音乐节律磁场刺激后,记录到的LTP幅值相对于没有磁刺激的LTP的幅值却降低了18.60%;第4步,实验发现,曲目1产生的音乐节律磁场对LTP增强调控效果最为明显;曲目1,2,3中的频率混叠效果导致其对LTP的调控弱于对应频率的曲目4,5,6产生的纯净正弦磁场;1500Hz的磁刺激是调控突触可塑性LTP增强和抑制转换的一个拐点频率;第5步,在实验开始前,利用LTP-director软件中IOcurve模式进行测试刺激,采用20-70μA,0.1Hz,的电流,依次对脑片进行刺激,记录刺激产生的fEPSP,并选择引起振幅最大值的50%的电流值作为最佳刺激参数,在测试刺激完成后,选择最佳的刺激电流,刺激电极位置选择在CA1区锥体细胞辐射层,实验中首先记录fEPSP的基线10min,基线记录后,采用HFS,频率100Hz,刺激脉冲为100次,持续时间为1s,诱导LTP,可塑性诱导的时间在整个实验过程中相对较短,故施加HFS高频电刺激的时间忽略不计,选择LTP诱导成功的脑片记录20min的fEPSP,保证fEPSP的幅值达到稳定状态,然后打开音乐磁场发生装置,对海马切片施加带有音乐节律磁场的刺激,本文磁场刺激时间选择为2min,磁场强度大小为2mT左右,磁刺激完成后继续记录20min的fEPSP,记录软件采用LTP-Director,在fEPSP的整个记录过程中,每分钟记录2个取样点,音乐节律磁场的刺激实验分成两组,一组定义为Exp1,主要完成曲目1,2,3节律磁场的磁刺激;另一组定义为Exp2,主要完成纯净正弦节律磁场,曲目4,5,6的磁刺激,每一个音乐节律磁场至少完成3个以上的有效脑片样本实验。

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