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摘要：本发明公开了一种用于MCF7外泌体检测的适配体传感器及其制备方法及MCF7外泌体的检测方法，所述制备方法为：将AptCD63溶液包被于96孔板中然后封闭；向包被有AptCD63的孔中加入MCF7外泌体溶液，培育，洗涤；将适配体EpCAM溶液与辣根过氧化物酶溶液混合孵育，得到AptEpCAM‑HRP溶液；加入AptEpCAM‑HRP溶液，培育，洗涤；当向所述适配体传感器中加入络氨酸包裹的金纳米颗粒溶液和过氧化氢水溶液，静置5分钟后络氨酸包裹的金纳米颗粒会产生聚集，反应液由红色转变为蓝色，利用紫外分光光度计即可实现对于MCF7外泌体的定量检测，且检测的灵敏度高。
主权项：1.一种用于MCF7外泌体检测的适配体传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：1将15uL1μM的AptCD63溶液包被于96孔板中，并在4℃的黑暗中保存10小时，然后以PBS缓冲液洗涤；2以15μL1％BSA溶液对AptCD63包被后的96孔板进行封闭，固定时间为10分钟，然后以PBS缓冲液洗涤；3向包被有AptCD63的孔中加入15μLMCF7外泌体溶液，培育30分钟，然后以PBS缓冲液洗涤；4将2μL5μM的适配体EpCAM溶液、2mgsulfo-SMCC与8μL100μM的辣根过氧化物酶溶液混合孵育10分钟，得到AptEpCAM-HRP溶液；5向步骤3得到的包被有AptCD63的孔中加入10μLAptEpCAM-HRP溶液，培育30分钟，然后以PBS缓冲液洗涤，即可得到所述用于MCF7外泌体检测的适配体传感器；当向所述适配体传感器中加入酪氨酸包裹的金纳米颗粒溶液和过氧化氢水溶液，静置5分钟后酪氨酸包裹的金纳米颗粒会产生聚集，反应液由红色转变为蓝色，利用紫外分光光度计即可实现对于MCF7外泌体的定量检测；所述AptCD63的核苷酸序列如下：AptCD63:5′-CACCCCACCTCGCTCCCGTGACACTAATGCTA-3′；所述适配体EpCAMAptEpCAM的核苷酸序列如下：AptEpCAM:5′-CACTACAGAGGTTGCGTCTGTCCCACGTTGTCATGGGGGGTTGGCCTG-3′。
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百度查询： 安徽师范大学 一种用于MCF7外泌体检测的适配体传感器及其制备方法及MCF7外泌体的检测方法
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