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摘要:本发明公开了一种TZAP基因敲除MCF‑7细胞株的构建方法及其应用,具体提供了一种用于TZAP基因敲除的sgRNA、表达载体和CRISPR‑Cas9表达系统。本发明通过前期研究发现以TZAP基因CDS区第678位至第697位核苷酸序列作为靶点设计sgRNA能够显著提高TZAP基因敲除效率、降低TZAP蛋白表达。此外,本发明对构建的TZAP基因敲除MCF‑7细胞株中TZAP蛋白表达情况进行检测,结果显示细胞株中无TZAP蛋白表达,说明采用本发明的sgRNA及其构建方法能够显著敲低TZAP蛋白表达。
主权项:1.一种用于TZAP基因敲除的sgRNA,其特征在于,所述sgRNA的靶标序列如SEQIDNO:1所示。
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百度查询: 广东药科大学 一种TZAP基因敲除MCF-7细胞株的构建方法及其应用
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