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申请/专利权人：上善康禾生物技术(扬州)有限公司

摘要：本发明涉及一种含有纳米硒的生物刺激素CMCS@AZO@SeNPs的制备方法，包括以下步骤：步骤S1、纳米硒SENPS的制备；步骤S2、纳米硒MSeNPs的制备；步骤S3、载嘧菌酯纳米颗粒Azo@SeNPs的制备；步骤S4、CMCS@Azo@SeNPs的制备；通过本发明，本发明以Na2SeO3（亚硒酸钠）为硒源，采用模板法制备SeNPs，通过溶剂挥发法对AZO（嘧菌酯）进行负载，再利用CMCS（羧甲基壳聚糖）对其进行包封，制备CMCS@AZO@SeNPs，并研究其载药能力、缓释性能、抑菌活性和对番茄植株的安全性。制备的嘧菌酯纳米农药可作为有效抑制植物病原菌的新型抗菌剂，为研发更多的用于植物病原菌防控的新型纳米抗菌剂提供了参考价值。

主权项：1.一种含有纳米硒的生物刺激素CMCS@AZO@SeNPs的制备方法，其特征是，包括以下步骤：步骤S1、纳米硒SENPS的制备；1.095g十六烷基三甲基溴化铵CTAB和160mL去离子水加入圆底烧瓶中进行加热搅拌，直至CTAB完全溶解后降至室温，再依次加入405mgNa2SeO3和150mgZnO，并在室温下搅拌6h；6h后通过超声溶解850mg维生素C加入反应液，并将溶液pH值调节至7.4，在35℃条件下继续搅拌12h；再通过离心收集红色沉淀，再将红色沉淀重新超声分散于100mL乙醇-盐酸溶液中，并在70℃下酸洗回流12h后离心收集沉淀，用乙醇洗涤2遍，去离子水洗涤1遍；最后将所得沉淀进行冷冻干燥12h，得到黑色固体纳米硒SeNPs；步骤S2、纳米硒MSENPS的制备；将经步骤S1合成得到的SeNPs超声分散于含有1.2g聚乙二醇400的70mL溶液当中，并在35℃条件下搅拌24h；然后在10000转分的转速下离心收集SeNPs，并用去离子水洗涤2次，冷冻干燥12h后获得修饰后的纳米硒MSeNPs；步骤S3、载嘧菌酯纳米颗粒AZO@SENPS的制备；400mg嘧菌酯AZO置于丙酮当中进行超声分散处理，配制质量浓度为5mgmL的嘧菌酯溶液；然后加入200mgMSeNPs并进行超声处理，使MSeNPs完全分散于溶液当中；在室温下密闭搅拌12h，再开盖继续搅拌直至丙酮完全挥发；用乙醇和去离子水各洗涤一遍，冷冻干燥后得到AZO@SeNPs；步骤S4、CMCS@AZO@SENPS的制备；200mg羧甲基壳聚糖CMCS溶解在30mL含有pH值为5.8的0.1molLMES2-N-吗啉乙磺酸的水溶液中，先在85℃下以800转分转速搅拌1h，然后温度降至35℃后继续搅拌0.5h；再将550mg1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐加入上述溶液搅拌活化0.5h，之后再加入300mgN-羟基丁二酰亚胺继续活化1.5h；将上述合成的100mgAZO@SeNPs均匀分散于20mL纯水中，加入到反应溶液中，降低转速至500rmin继续搅拌24h，通过离心收集沉淀，用乙醇洗涤1遍和去离子水洗涤2遍后进行冷冻干燥，得到固体CMCS@AZO@SeNPs。

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