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申请/专利权人：上海龙殷生物科技有限公司
摘要：本发明公开了一种提高感受态细胞转化率的方法，在感受态细胞的制备或存放的过程中加入糖脂类生物表面活性剂，从而显著提高感受态细胞的转化率。
主权项：1.一种提高感受态细胞转化率的方法，其特征在于，在菌株的预培养阶段或感受态细胞的冻存阶段加入糖脂类生物表面活性剂；所述的糖脂类生物表面活性剂包括槐糖脂或鼠李糖脂；所述感受态细胞的制备过程包括如下步骤：步骤1.1：将大肠杆菌在LB琼脂平板上划线，37℃培养16～20h；步骤1.2：在划线平板上挑一个单菌落于盛有20mLLB培养基的250mL三角瓶中;37℃振荡培养到细胞的OD600值为0.3～0.5之间；步骤1.3：将培养物于冰溶中放置10min，然后转移到10mL预冷的无菌离心管中，4000rmin，0℃～4℃离心10min；步骤1.4：弃上清，倒置离心管1min，流尽剩余液体后，置于冰浴10min；步骤1.5向离心管加入5mL用冰预冷的0.1molLCaCl2溶液悬浮细胞，置冰浴中20min；步骤1.6：4000rmin，0℃～4℃离心10min回收菌体，弃上清，向离心管加入1mL冰冷的0.1molLCaCl2溶液，重新悬浮细胞；步骤1.7：按每份200μL分装细胞于无菌小塑料离心管中，加入浓度为50％的无菌甘油200μL，混合作为感受态细胞置-20℃存放备用；在所述步骤1.2和所述步骤1.7的LB培养基中添加浓度为1gL槐糖脂，或者在所述步骤1.2和所述步骤1.7的LB培养基中添加浓度为1gL鼠李糖脂。
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百度查询： 上海龙殷生物科技有限公司 一种提高感受态细胞转化率的方法
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