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BVDV、BCoV、BRV及BNeV的四重RT-PCR检测引物组及检测方法 

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申请/专利权人:云南农业大学

摘要:本发明属于病毒检测技术领域,提供了BVDV、BCoV、BRV及BNeV的四重RT‑PCR检测引物组及检测方法,方法包括以下步骤:S1、模板制备,使用BRV、BCoV、BVDV、BNeV的基因片段作为阳性样品模板;S2、以BRV、BCoV、BVDV、BNeV的基因片段为阳性样品模板,分别用各自引物对BRV‑VP6基因、BCoV‑NSP2基因、BVDV‑5’UTR基因、BNeV‑RDRP基因序列进行RT‑PCR扩增;S3、电泳分析;S4、胶回收、克隆和连接转化;S5、质粒提取和测序;S6、结果分析;本发明通过四重RT‑PCR检测法,获得与单一RT‑PCR检测法一样的特异性和敏感性,大大节省了检测成本,对临床标本的准确诊断和养牛业的健康发展具有较强的实用价值。

主权项:1.BVDV、BCoV、BRV及BNeV的四重RT-PCR检测引物组,其特征在于,引物组包括如下四对引物:检测牛轮状病毒的引物对为:BRV-F:GTACGATGTGGCTATACGC,BRV-R:ATGCTGCTACTGCTCGTGT;检测牛病毒性腹泻病毒的引物对为:BVDV-F:CGAAGGCCGATAAGAGGCTA,BVDV-R:GAACCATTGACGACTCCCCT;检测牛冠状病毒的引物对为:BCoV-F:CGAGTTGAACACCCAGAT,BCoV-R:GAGACGGGCATCTACACT;检测牛纽布病毒的引物对为:BNeV-F:GTGTCGGGACCAGTGTTCCT,BNeV-R:AATTAGCACCGGCTTCTTC。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 云南农业大学 BVDV、BCoV、BRV及BNeV的四重RT-PCR检测引物组及检测方法

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