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摘要：本发明属于病毒检测技术领域，提供了BVDV、BCoV、BRV及BNeV的四重RT‑PCR检测引物组及检测方法，方法包括以下步骤：S1、模板制备，使用BRV、BCoV、BVDV、BNeV的基因片段作为阳性样品模板；S2、以BRV、BCoV、BVDV、BNeV的基因片段为阳性样品模板，分别用各自引物对BRV‑VP6基因、BCoV‑NSP2基因、BVDV‑5’UTR基因、BNeV‑RDRP基因序列进行RT‑PCR扩增；S3、电泳分析；S4、胶回收、克隆和连接转化；S5、质粒提取和测序；S6、结果分析；本发明通过四重RT‑PCR检测法，获得与单一RT‑PCR检测法一样的特异性和敏感性，大大节省了检测成本，对临床标本的准确诊断和养牛业的健康发展具有较强的实用价值。
主权项：1.BVDV、BCoV、BRV及BNeV的四重RT-PCR检测引物组，其特征在于，引物组包括如下四对引物：检测牛轮状病毒的引物对为：BRV-F：GTACGATGTGGCTATACGC，BRV-R：ATGCTGCTACTGCTCGTGT；检测牛病毒性腹泻病毒的引物对为：BVDV-F：CGAAGGCCGATAAGAGGCTA，BVDV-R：GAACCATTGACGACTCCCCT；检测牛冠状病毒的引物对为：BCoV-F：CGAGTTGAACACCCAGAT，BCoV-R：GAGACGGGCATCTACACT；检测牛纽布病毒的引物对为：BNeV-F：GTGTCGGGACCAGTGTTCCT，BNeV-R：AATTAGCACCGGCTTCTTC。
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百度查询： 云南农业大学 BVDV、BCoV、BRV及BNeV的四重RT-PCR检测引物组及检测方法
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