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一种含poly(A)尾质粒测序的NGS方法及其应用 

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申请/专利权人:苏州金唯智生物科技有限公司

摘要:本发明提供了一种含polyA尾质粒测序的NGS方法及其应用,所述NGS方法包括:采用打断末端反应体系对待检质粒DNA进行打断反应,打断反应的条件为:热盖温度70±2℃,37±2℃反应1‑3分钟,65±2℃反应14‑16分钟;所述打断末端反应体系包括:打断反应缓冲液、待检质粒DNA和片段化酶混合液;在连接反应体系中将打断后的片段与接头连接,以非扩增方式构建测序文库;对待测的测序文库进行质检和测序;对测序下机数据进行结果分析统计。所述方法简便快捷、适用广泛,可以实现低样本核酸投入量非扩增建库高通量测序,对于mRNA疫苗质粒的质检与有效性评估具有较高的参考价值,适于推广应用。

主权项:1.一种含polyA尾质粒测序的NGS方法,其特征在于,所述NGS方法包括:1采用打断末端反应体系对待检质粒DNA进行打断反应,打断反应的条件为:热盖温度70±2℃,37±2℃反应1-3分钟,65±2℃反应14-16分钟;所述打断末端反应体系包括:打断反应缓冲液、待检质粒DNA和片段化酶混合液;2在连接反应体系中将打断后的片段与接头连接,以非扩增方式构建测序文库;3对待测的测序文库进行质检和测序;4对测序下机数据进行结果分析统计。

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