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申请/专利权人:新疆中亚果树产业研究院有限公司
摘要:本发明公开了一种神香草组织快繁方法,包括以下步骤:1)外植体诱导培养:取神香草种子进行消毒,将消毒后的种子播种到无菌培养基上培养;2)生根与炼苗:剪取3‑5cm茎段插入到含有无糖培养液基质的培养盒中,适宜培养条件下进行生根与炼苗培养10‑15天;3)移栽:打开培养盒盒盖,预处理1‑2天后进行移栽。该方法以神香草种子为外植体,通过消毒诱导培养,剪取茎段或顶端插入无糖培养液的基质中进行生根与炼苗,降低污染概率,并且可以保持种苗的优良特性,使后代保持高度一致性,还可以实现神香草种苗工厂化生产,有利于促进神香草规模化种植和生产。
主权项:1.一种神香草组织快繁方法,其特征在于,包括以下步骤:1)外植体诱导培养:取神香草种子进行消毒,将消毒后的种子播种到无菌培养基上培养;2)生根与炼苗:剪取3-5cm茎段插入到含有无糖培养液基质的培养盒中,适宜培养条件下进行生根与炼苗培养10-15天;3)移栽:打开培养盒盒盖,预处理1-2天后进行移栽;所述步骤1)中所述神香草种子先置于75%的酒精消毒30s,然后用无菌蒸馏水清洗3-5次,再用含1%-2%次氯酸钠的84消毒液处理3-5min,然后用无菌蒸馏水震荡清洗3-5次,震荡清洗频率为1-2min次;最后将消毒后的种子播种到12MS固体培养基中;所述步骤1)中消毒后的种子播种到12MS固体培养基中,在温度为0℃-10℃的环境中避光处理1-2天后置于温度为23-25℃的环境中进行光照培养,光照时间为16h天,光照强度为3000-8000lx;所述步骤2)中剪取3-5cm茎段,对每个茎段进行去叶片处理,摘去多余叶片仅保留上端2-3片叶片,把去叶片处理后的茎段插入无糖培养基质中;在温度为20-23℃的环境中预培养1-2天,预培养每天的光照时间为14-16h,预培养的光照强度为2000-6000lx;所述步骤2)中无糖培养基质为在不含蔗糖的12MS培养液加入0.1-0.2mgL的吲哚丁酸IBA或0.1-0.3mgL的萘乙酸(NAA)的基质,基质为蛭石或珍珠岩,每1.5L基质中加入0.8-1.0L营养液;所述步骤2)中预培养结束后,调整培养条件:培养温度调整为23-25℃,光照强度调整为6000-10000lx,每天的光照时间为14-16h;所述步骤2)调整培养条件:培养室内CO2浓度控制在1000-2000ppm,并向培养盒间歇性输入含有CO2的空气;向培养盒间歇性输入含有CO2的空气在光照时间的供气频率为:每供气10-15min暂停20-30min后再供气10-15min,如此反复;以后每隔两天供气量逐渐增加200mlmin,一直增加到1600-2000mlmin;所述步骤3)中在移栽前1-2天,打开培养盒盖,静置培养,静置培养的温度为23-25℃,静置培养的光照强度为6000-10000lx,静置培养每天的光照时间为14-16h,静置培养时保持培养室内CO2浓度为1000-2000ppm。
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