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申请/专利权人:宁波鲲鹏生物科技有限公司
摘要:提供了含有荧光蛋白片段的融合蛋白及其用途。本发明的融合蛋白具有P1‑L1s‑A1‑Xn‑A2‑L2‑P2t所示的结构,其中Xn或A1‑Xn可促进融合目的肽的折叠和表达,并且可提高融合蛋白的溶解性并降低融合蛋白的分子间相互作用。融合蛋白中的Xn或A1‑Xn可以被酶切成多个长度远小于目的肽的短肽,有利于其与目的肽分离,使目的肽纯化更方便。
主权项:1.一种融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白包括式I所示的结构:P1-L1s-A1-Xn-A2-L2-P2tI式中,“-”为肽键或连接肽,各个P1各自独立地为第一目的肽;各个P2各自独立地为第二目的肽;各个L1各自独立地为无或第一连接肽;各个L2各自独立地为无或第二连接肽;A1为无或信号肽;A2为无或信号肽;各X独立地为荧光蛋白的单个b-折叠单元;n为1-8的正整数;s为0、1、或2;t为0、1、或2;以及附加条件是s和t不同时为0;所述的X选自下组: X 氨基酸序列 u1 VPILVELDGDVNGSEQIDNO.:1 u2 HKFSVRGEGEGDATSEQIDNO.:2 u3 KLTLKFICTTSEQIDNO.:3 u4 YVQERTISFKDSEQIDNO.:4 u5 TYKTRAEVKFEGDSEQIDNO.:5 u6 TLVNRIELKGIDFSEQIDNO.:6 u7 HNVYITADKQSEQIDNO.:7 u8 GIKANFKIRHNVEDSEQIDNO.:8 u9 VQLADHYQQNTPIGSEQIDNO.:9 u10 HYLSTQSVLSKDSEQIDNO.:10 u11 HMVLLEFVTAAGISEQIDNO.:11 ;所述Xn为u8、u9、u2-u3、u4-u5、u8-u9、u1-u2-u3、u2-u3-u4、u3-u4-u5、u5-u6-u7、u8-u9-u10、u9-u10-u11、u3-u5-u7、u3-u4-u6、u4-u7-u10、u6-u8-u10、u1-u2-u3-u4、u2-u3-u4-u5、u3-u4-u3-u4、u3-u5-u7-u9、u5-u6-u7-u8、u1-u3-u7-u9、u2-u2-u7-u8、u7-u2-u5-u11、u3-u4-u7-u10、u1-I-u2、u1-I-u5、u2-I-u4、u3-I-u8、u5-I-u6、或u10-I-u11;I为柔性接头;所述的P1和P2各自独立地选自:人胰岛素前体蛋白、赖脯胰岛素的前体蛋白、甘精胰岛素的前体蛋白、胰高血糖素样肽及其衍生物艾塞那肽和利拉鲁肽、胰岛素、替度鲁肽。
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