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申请/专利权人:臻赫医药(杭州)有限公司
摘要:本申请实施例提供的高通量测序文库的构建方法、试剂盒及应用,利用Tn5转座酶复合体将基因组样品中DNA进行随机打断,得到DNA打断产物;将RNA富集探针和DNA打断产物进行分子杂交,并利用链霉亲和素磁珠收集分子杂交产物中RNA‑DNA复合物;对RNA‑DNA复合物进行甲基化处理及PCR扩增,得到测序文库;通过上述方式,实现了对基因组样品中目标甲基化位点的定向富集,当需要增加新的目标甲基化位点时只需针对其设计RNA富集探针;当需要删除被证明效果不佳的目标甲基化位点时只需将其对应的RNA富集探针去除;并且,通过目标甲基化位点的定向富集,降低了基因组样品浓度需求,有利于实现痕量检测。
主权项:1.一种高通量测序文库的构建方法,其特征在于,包括:利用Tn5转座酶复合体将基因组样品中DNA进行随机打断,得到DNA打断产物,其中,Tn5转座酶复合体包埋有用于测序的接头序列;将RNA富集探针和所述DNA打断产物进行分子杂交,并利用链霉亲和素磁珠收集分子杂交产物中RNA-DNA复合物,其中,所述RNA富集探针为生物素标记的RNA探针序列,所述RNA探针序列包括目标甲基化位点结合序列;对所述RNA-DNA复合物进行甲基化处理,得到甲基化处理产物;对所述甲基化处理产物进行PCR扩增,得到测序文库。
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权利要求:
百度查询: 臻赫医药(杭州)有限公司 高通量测序文库的构建方法、试剂盒及应用
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