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申请/专利权人：南京农业大学;新疆农业科学院园艺作物研究所
摘要：本发明公开了一种快速获得新疆芜菁转基因材料的方法，该方法是以芜菁高代自交系‘XJ‑WJ’为试验材料，首先对影响毛状根产生的植株苗龄、外植体类型、菌液浓度、侵染时间、共培养时间、乙酰丁香酮（AS）浓度、抗生素类型等因素进行综合研究，确定获得芜菁阳性毛状根的最优因子组合；随后，探究毛状根诱导植株再生的培养基和激素配比，建立了发根农杆菌介导芜菁高效遗传转化体系。研究结果将为影响芜菁关键生物学性状的基因功能验证与种质创新提供技术支持。
主权项：1.一种快速获得新疆芜菁转基因材料的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）外植体制备对芜菁种子进行消毒，接种到MS培养基上，获得无菌苗；待无菌苗生长到6d时，切除实生根获得无根苗，备用；（2）活化携带目的基因的发根农杆菌；（3）侵染无菌苗的前10h使用LB液体培养基摇菌，摇菌后使用12MS液体培养基调整菌液浓度（OD600），并加入乙酰丁香酮；（4）待无菌苗生长到6d时，切除实生根获得无根苗，使用步骤（3）中的菌液侵染无根苗；（5）侵染后的植株在无菌滤纸上晾干，随后接种到MS培养基上共培养36h；（6）共培养结束后，将植株转移到脱菌培养基上进行培养；（7）培养30d后，对再生的毛状根进行表型鉴定，鉴定出转基因毛状根；（8）以转基因毛状根为外植体接种至愈伤组织培养基上诱导转基因愈伤组织；（9）将转基因愈伤组织切成小块转移至芽诱导培养基诱导转基因再生芽。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南京农业大学 新疆农业科学院园艺作物研究所 一种快速获得新疆芜菁转基因材料的方法
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