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申请/专利权人：东莞理工学院

摘要：本发明公开了一种干腌火腿来源抗氧化肽复合物，其特征在于：包含42个分子量3.0kDa的肽段，其中占比最高的三个肽段分别为占比23.56％的生物活性肽1，占比13.64％的生物活性肽2，占比12.98％的生物活性肽3，所述的生物活性肽1的氨基酸序列为：LGEHNIDVLEGNEQFINAAK，所述的生物活性肽2的氨基酸序列为：GHYTEGAELVDSVLDVVR，所述的生物活性肽3的氨基酸序列为：DLVILLYETALLSSGFSLEDPQTHANR。该抗氧化肽复合物能够耐受胃肠道消化酶的消化，可有效清除ABTS·+和氧自由基ORAC，并具有良好的Fe2+螯合能力，可有效修复过氧化氢诱导的细胞氧化损伤，该生物活性肽复合物对开发具有抗氧化功能的保健品和药物具有十分重要的意义。

主权项：1.一种干腌火腿来源抗氧化肽复合物，其特征在于：包含42个分子量3.0kDa的肽段，其中占比最高的三个肽段分别为占比23.56％的生物活性肽1，占比13.64％的生物活性肽2，占比12.98％的生物活性肽3，所述的生物活性肽1的氨基酸序列为：LGEHNIDVLEGNEQFINAAK，所述的生物活性肽2的氨基酸序列为：GHYTEGAELVDSVLDVVR，所述的生物活性肽3的氨基酸序列为：DLVILLYETALLSSGFSLEDPQTHANR，活性肽的制备方法包括以下步骤：1样品的选择与制备选取五个来自不同火腿的肱二头肌部分的肉块作为全部实验的五个平行样品，宣威火腿选用肌肉部分，用刀具切成小块，然后将分装好的宣威火腿置于4℃冰箱中；2模拟口腔咀嚼分别取5g宣威火腿肱二头肌部分于100mL离心管中，分别加入15mL模拟唾液电解质与75μL二水氯化钙溶液，将离心管置于烧杯中冰浴，使用匀浆机均质以模拟人体口腔咀嚼；3模拟胃部消化分别在匀质好的肉糜样品中加入10mL模拟胃液电解质，将样品的pH值调节至2.5，按照酶：样品＝1：20ww加入0.24g胃蛋白酶粉末，将恒温摇床培养箱设置参数为温度37℃，转速为100rpm，反应时间为2h，匀速振荡以模拟人体胃部消化；4模拟小肠消化取上述胃食糜样品，加入24mL模拟肠液电解质，将样品的pH值调节至7.0，加入0.25g牛胆盐及按照酶：样品＝1：50ww加入0.1g胰蛋白酶粉末，置于37℃恒温摇床中以100rpm转速匀速振荡反应2h，得到模拟消化液；5收集粗肽粉将体外模拟消化的消化液样品于95℃水浴锅中水浴加热10min，当温度冷却至室温后，使用冷冻离心机，于4℃、12000×g条件下离心20min，离心结束后，收集离心管中的上层清液，使用0.45μm醋酸纤维膜滤纸抽滤，抽滤完成后，再使用真空冷冻干燥机对滤液进行真空冷冻干燥，即得到体外模拟消化液粗肽粉；6凝胶过滤层析用4mL超滤离心管对粗肽粉进行超滤，取冻干后小于3kDa的肽粉复溶，用层析柱对肽粉进行分离纯化；检测器的检测波长为280nm，待样品峰出现后，选用蛋白收集器每管收集5mL洗脱液，将属于同一峰段的洗脱液混合成同一样品，再用冷冻干燥法将洗脱样品冻干得到多肽粉末。

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