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申请/专利权人：华侨大学
摘要：本发明公开了基于琼脂糖凝胶的星虫纤溶酶亲和纯化方法及其纤溶酶和应用。本发明包含以下步骤：1在含星虫纤溶酶的原液中添加80～90％的硫酸铵，静置过夜沉淀；2Tris‑HCl缓冲液重悬上述沉淀，将重悬液流过经Tris‑HCl缓冲液平衡好的赖氨酸‑琼脂糖凝胶层析柱或精氨酸‑琼脂糖凝胶层析柱，再进行NaCl梯度洗脱，收集洗脱液；3用3kD超滤管对收集洗脱液进行浓缩及脱盐，得到高纯纤溶酶制品。本发明纯化步骤少、设备要求低、成本低、纯度高，且获得的纤溶酶具有很好的纤溶活性。
主权项：1.一种基于琼脂糖凝胶的星虫纤溶酶亲和纯化方法，其特征在于：星虫纤溶酶的粗提液用赖氨酸-琼脂糖凝胶亲和层析柱或精氨酸-琼脂糖凝胶亲和层析柱进行亲和层析，上样流速为0.8～1.2mLmin；上样后先用pH7.8～8.2的0.01～0.03molLTris-HCl缓冲液以1.8～2.2mLmin的流速清洗平衡4～6个柱体积，再用0.14～0.16M、0.24～0.26M、0.34～0.36M、0.44～0.46M、0.54～0.56M、0.64～0.66M的NaCl溶液以0.8～1.2mLmin的流速依次进行分段洗脱，各洗脱4～6个柱体积；收集0.14～0.16M的NaCl溶液洗脱主峰对应样品，用3K超滤管超滤浓缩及脱盐，得到纯化的纤溶酶。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 华侨大学 基于琼脂糖凝胶的星虫纤溶酶亲和纯化方法及其纤溶酶和应用
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