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申请/专利权人:广东优尼德生物科技有限公司
摘要:本发明属于基因工程及医学检测技术领域,公开了一种基于重组RNP多抗原的抗RNP抗体化学发光检测试剂盒。所述试剂盒包括包被RNP‑A、RNP‑C和RNP‑6870抗原的磁性微球反应液、吖啶酯或吖啶磺酰胺标记的抗体和发光底物;所述RNP‑A,RNP‑C和RNP‑6870抗原通过人胚肾上皮细胞HEK293表达获得。所述包被抗原的磁性微球反应液通过生物素标记的混合抗原溶液与链霉亲和素磁性微球溶液混合孵育得到。本发明采用RNP‑A、RNP‑C和RNP‑6870三个抗原的混合物进行生物素标记后,与链霉亲和素磁珠交联,并结合吖啶酯化学发光体系,可以提高检出的特异性、准确性和敏感性。
主权项:1.一种基于重组RNP多抗原的抗RNP抗体化学发光检测试剂盒,其特征在于,包括包被RNP-A、RNP-C和RNP-6870抗原的磁性微球反应液、吖啶酯或吖啶磺酰胺标记的抗体、发光底物和样本稀释液;所述RNP-A、RNP-C和RNP-6870抗原通过如下方法获得:(1)人工合成RNP-A、RNP-C和RNP-6870的基因序列,然后分别克隆至pcDNA3.1(+)载体,得到重组质粒;(2)将步骤(1)所得重组质粒分别转化至HEK293细胞进行表达,得到RNP-A、RNP-C和RNP-6870抗原;所述包被RNP-A、RNP-C和RNP-6870抗原的磁性微球反应液通过如下方法制备得到:1)抗原的生物素标记:将Biotin-PEG-NHS与RNP-A、RNP-C和RNP-6870抗原溶液混合孵育,得到生物素标记的混合抗原溶液;2)将步骤1)所得生物素标记的混合抗原溶液与链霉亲和素磁性微球溶液混合孵育,得到包被RNP-A、RNP-C和RNP-6870抗原的磁性微球反应液;所述样本稀释液为含有BSA和聚醚改性聚硅氧烷的Tris缓冲液;所述样本稀释液中BSA的质量浓度为1%~2%;所述聚醚改性聚硅氧烷的质量浓度为1%~2%。
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百度查询: 广东优尼德生物科技有限公司 一种基于重组RNP多抗原的抗RNP抗体化学发光检测试剂盒
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