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申请/专利权人:广西壮族自治区农业科学院
摘要:本发明公开了一种水稻部分雄性不育突变体oswsd1植株的制备方法,涉及基因工程技术领域。本发明水稻部分雄性不育突变体oswsd1植株的制备方法包括以下步骤:设计水稻部分雄性不育基因OsWSD1的sgRNA靶序列;根据所述靶序列设计合成单核苷酸序列引物后制得单核苷酸序列,将单核苷酸序列与质粒连接,构建含有水稻OsWSD1基因靶序列的重组质粒CRISPRCas9‑WSD1;用含所述重组质粒的农杆菌侵染水稻后,对所述水稻进行处理和培育,获得水稻植株;通过特异性引物扩增水稻植株的基因组片段、测序,筛选出突变株。本发明获得了水稻部分雄性不育突变体oswsd1,该突变体的花粉育性和结实率降低,对水稻生产有很好的应用价值。
主权项:1.一种水稻部分雄性不育突变体oswsd1植株的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1设计水稻部分雄性不育基因OsWSD1的sgRNA靶序列;所述OsWSD1基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示,氨基酸序列如SEQIDNO.1所示;所述靶序列如SEQIDNO.6所示;2根据所述靶序列设计合成单核苷酸序列引物,所述引物如SEQIDNO.4和SEQIDNO.5所示;3将单核苷酸序列与质粒进行连接,构建含有水稻OsWSD1基因靶序列的重组质粒CRISPRCas9-WSD1;4用含所述CRISPRCas9-WSD1重组质粒的农杆菌侵染水稻后,对所述水稻进行处理和培育,获得水稻植株;5通过OsWSD1基因的特异性引物扩增步骤4获得的水稻植株的基因组片段,并进行测序鉴定,鉴定出的突变株即为所述水稻部分雄性不育突变体oswsd1植株。
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百度查询: 广西壮族自治区农业科学院 一种水稻部分雄性不育突变体oswsd1植株的制备方法
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