买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：广东省农业科学院动物卫生研究所;广东永顺生物制药股份有限公司

摘要：本发明属于生物领域，公开了一种基于猪德尔塔冠状病毒N蛋白的多克隆抗体，采用氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的N蛋白免疫雌性新西兰大白兔；免疫三次，第三次免疫后14天对雌性新西兰大白兔进行心脏采血分离，得到兔源多克隆抗体。该多克隆抗体具有超高效价，最大效价可达到4，096，000。

主权项：1.一种基于猪德尔塔冠状病毒N蛋白的多克隆抗体，其特征在于，采用氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的N蛋白免疫雌性新西兰大白兔；免疫三次，第三次免疫后14天对雌性新西兰大白兔进行心脏采血分离，得到兔源多克隆抗体；其中，第一次免疫采用含N蛋白的蛋白液和弗氏完全佐剂按照1:1的体积比混合后，按照每只雌性新西兰大白兔免疫550μgN蛋白的剂量进行免疫；第一次免疫后14天进行第二次免疫，第一次免疫后28天进行第三次免疫；第二次免疫和第三次免疫采用含N蛋白的蛋白液和弗氏不完全佐剂按照1:1的体积比混合后，按照每只雌性新西兰大白兔免疫550μgN蛋白的剂量进行免疫；蛋白液中N蛋白的浓度为12.6mgmL；所述弗氏不完全佐剂的品牌为：Sigma-Aldrich，产品型号为F5506；所述弗氏完全佐剂的品牌为：Sigma-Aldrich，产品型号为F5881；所述N蛋白的制备方法为：采用核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的PDCoV-N基因片段和原核表达载体进行连接，得到连接产物；将连接产物进行转化至DH5α感受态细胞得到质粒；将质粒转化至BL21（DE3）感受态细胞得到阳性单克隆菌落；培养并收集阳性单克隆菌落，从阳性单克隆菌落中分离得到PDCoV-N-GST重组蛋白；将PDCoV-N-GST重组蛋白和GlutathioneSepharose4B按照体积比2:1的比例混匀，并按重量比1:100比例加入3C蛋白酶，置于翻转摇床过夜，然后加入层析柱中，收集流穿液，流穿液中所含的蛋白即为切除GST标签的N蛋白；所述原核表达载体为原核表达载体pGEX-6P-1。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 广东省农业科学院动物卫生研究所 广东永顺生物制药股份有限公司 一种基于猪德尔塔冠状病毒N蛋白的多克隆抗体