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基于CRISPR-Cas9构建ERβ全敲小鼠模型的方法 

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申请/专利权人:重庆医科大学

摘要:本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种基于CRISPR‑Cas9构建ERβ全敲小鼠模型的方法;包括获取小鼠ERβ核苷酸序列引物序列和小鼠ERβ的gRNA序列;设计小鼠ERβ的gRNA,分别在ERβ10个外显子中选定外显子2上游、外显子5下游和外显子10下游插入三段gRNA,将三段gRNA和Cas9mRNA共同注射到受精的小鼠卵中;筛选作为ERβ敲除的纯合子代,作为ERβ全敲小鼠模型;通过CRISPR‑Cas9技术构建ERβ全身敲除小鼠,通过行为学、形态学、蛋白定量、核酸定量等手段检测ERβ缺乏是否对小鼠学习记忆有损害及可能的相关作用机制,并且结合形态学手段观察ERβ敲除小鼠神经细胞成熟度,以期为揭示以ERβ为靶点的认知障碍性疾病的发病机制提供新的依据。

主权项:1.一种基于CRISPR-Cas9构建ERβ全敲小鼠模型的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一:获取小鼠ERβ核苷酸序列引物序列和小鼠ERβ的gRNA序列;步骤二:将小鼠ERβ的gRNA和Cas9mRNA共同注射到受精的小鼠卵中;步骤三:筛选作为ERβ敲除的纯合子代,作为ERβ全敲小鼠模型。

全文数据:

权利要求:

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