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使用3’-氧亚甲基烷基化二硫保护的核苷酸用于酶促DNA和RNA合成 

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申请/专利权人:美天施生物科技有限两合公司

摘要:本发明涉及使用3’‑O‑CH2SSR保护的可逆核苷酸终止子酶促合成核酸。受保护的核苷酸的核苷酸碱基可以由天然或非天然例如7‑脱氮G和7‑脱氮A或其混合物组成。核苷酸的碱基可以用接头修饰,所述接头携带羧酸‑CO2H、胺‑NH2、硫醇‑SH、羟甲基‑CH2OH、炔丙胺、炔基等用于随后的修饰和标记。此类核苷酸底物可以掺入单链、非模板核酸中或掺入模板DNA杂交体中。并且在随后的步骤中,3’‑O‑CH2SSR保护基团可以通过酶促核酸合成的化学处理先决条件被切割掉。通过以预先确定的方式加入核苷酸并在每个步骤后进行切割反应,可以从短的种子DNA链开始在溶液中或固体表面上合成较长的DNA链。

主权项:1.一种用于合成DNA或RNA链的方法,所述方法包括以下步骤:a提供能够与核苷酸结合的引物b提供根据通式I的第一核苷酸 其中B=天然或非天然的核碱基R=-Me、-Et、-Pr、-iPr、-iBu、CH2CH2NH2、CH2CH2CNR1,R2=H、D、-Me、-Et、-Pr、-iPr、-iBu、CHF2CH2CH2Fc提供末端转移酶,从而将所述第一核苷酸连接至所述引物d将保护基团SS-R从所述第一核苷酸上切割并除去e通过提供另外的根据通式I的核苷酸重复步骤b至d,从而获得DNA或RNA链。

全文数据:

权利要求:

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