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雨生红球藻提取物的酶解方法及应用 

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申请/专利权人:美尚(广州)化妆品股份有限公司

摘要:本发明涉及一种雨生红球藻提取物的酶解方法,以及使用该酶解方法得到的酶解产物的应用。酶解方法包括向雨生红球藻制备的藻蛋白溶液中加入蛋白酶,并且采用Box‑Behnken响应面法对工艺进行优化,以体外总抗氧化能力为响应值,选取酶添加量、酶解pH、酶解温度和酶解时间四个响应变量,以单因素实验最优点为中心,围绕所述中心上下各取一个水平值作为响应面水平,对各响应变量数据进行多元回归分析,获得回归方程以及得到最佳酶解条件。

主权项:1.一种雨生红球藻提取物的酶解方法,其特征在于,所述雨生红球藻提取物的制备方法包括如下步骤:使用雨生红球藻干粉和去离子水配置质量浓度为10wt%的藻液;向所述藻液中添加纤维素酶和果胶酶进行酶解,然后使用超声波细胞粉碎机将溶液进行超声破碎,破碎后离心15min,收集上清得到藻蛋白溶液;所述酶解方法包括:向雨生红球藻制备的藻蛋白溶液中加入蛋白酶,所述蛋白酶选自中性蛋白酶,酶解结束后在90℃水浴条件下灭活10min,冷却至室温后离心取上清,过滤得到酶解产物;基于Box-Behnken响应面法,以体外总抗氧化能力为响应值,选取酶添加量、酶解pH、酶解温度和酶解时间四个响应变量,以单因素实验最优点为中心,围绕所述中心上下各取一个水平值作为响应面水平,对各响应变量数据进行多元回归分析,获得回归方程:Y=163.86-3.27A+3.46B+2.34C+1.91D-1.55AB-0.7175AC-0.8475AD+3.81BC-1.78BD-1.70CD-9.36A2-3.70B2-6.77C2-3.03D2,其中,A为酶解时间,B为酶添加量,C为酶解pH,D为酶解温度,Y为体外总抗氧化能力,所述酶添加量、酶解pH、酶解温度和酶解时间四个响应变量满足以下任意一组:Ⅰ所述酶添加量为0.1%,所述酶解温度为50℃,所述酶解时间为4h,所述酶解pH为6.5、7.0、7.5、8.0、8.5或9.0;Ⅱ所述酶添加量为0.1%,所述酶解pH为7.0,所述酶解时间为4h,所述酶解温度为30℃、40℃、50℃或60℃;Ⅲ所述酶添加量为0.1%,所述酶解pH为7.0,所述酶解温度为50℃,所述酶解时间为0.5h、1h、1.5h、2h、3h、4h或5h;Ⅳ所述酶解pH为7.0,所述酶解温度为50℃,所述酶解时间为4h,所述酶添加量为0.1%、0.4%、1.0%、2.0%、3.0%或4.0%;Ⅴ所述酶添加量为2.7%,所述酶解pH为8.6,所述酶解温度为40℃,所述酶解时间为53min。

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