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3D打印曲率生物角膜的制备方法及其在预防角膜基质纤维化中的应用 

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申请/专利权人:华南理工大学

摘要:本发明公开了一种3D打印曲率生物角膜的制备方法,包括以下步骤:在I型胶原的溶液中加入1‑乙基‑33‑二甲基氨丙基碳化二亚胺、N‑羟基丁二酰亚胺和2,3‑环氧丙基三甲基氯化铵,制备得到改性胶原;将改性胶原加入可光交联GelMA溶液,在中性条件下溶解,得到3D打印墨水;将角膜基质细胞重悬于3D打印墨水中,得到生物墨水;将生物墨水装于3D打印料筒中,进行3D打印。本发明还公开了3D打印曲率生物角膜的制备方法制备得到的3D打印曲率生物角膜在预防角膜基质纤维化中的应用。本发明解决了大分子量胶原无法在中性条件下溶解的难题,制备的角膜具有完整的复杂结构,负载的细胞活性高,并且能预防纤维化的发生。

主权项:1.一种3D打印曲率生物角膜的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将I型胶原加入无机酸溶剂中,搅拌均匀,除去溶液中的气泡,得到胶原溶液;所述I型胶原为牛肌腱中提取的经纯化过的I型胶原;将1-乙基-33-二甲基氨丙基碳化二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺加入胶原溶液中,随后加入2,3-环氧丙基三甲基氯化铵,在29~30℃条件下充分搅拌均匀,离心除去气泡,得到改性胶原溶液;将改性胶原溶液透析,冻干,得到改性胶原;将甲基丙烯酰胺基明胶溶于无机盐或水中,配置成GelMA溶液;将光引发剂溶于所述GelMA溶液中,得到可光交联GelMA溶液;将所述改性胶原加入所述可光交联GelMA溶液中,在中性条件下溶解,得到3D打印墨水;将角膜基质细胞重悬于所述3D打印墨水中,得到用于3D打印曲率生物角膜的生物墨水;将生物墨水装于3D打印料筒中,进行3D打印;所述3D打印具体为,在以下条件下进行3D打印:料筒温度为25~30℃,打印平台温度为10~20℃,打印气压为0.01MPa~0.2MPa,打印速度为4mms~10mms,紫外光固化强度为100mWcm2;所述3D打印的路径为:沿着凸台由下而上,由外而内,以螺旋上升的方式连续层层打印。

全文数据:

权利要求:

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