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申请/专利权人：首都医科大学宣武医院
摘要：本发明涉及一种外周血Hb‑Aβ复合物定量检测试剂盒、检测方法及应用，本发明所述方法包括，将ProteinG或链霉亲和素固定在固相载体上，随后加入抗Hb抗体或生物素化抗Hb抗体形成结合体，与样本中的Hb‑Aβ复合物，然后分别与酶标抗Aβ抗体、化学发光液反应的步骤，或分别与生物素标记抗Aβ抗体、酶标亲和素、化学发光液反应的步骤；本发明还涉及在液相反应液中首先形成Hb‑Aβ‑AAβ复合物，复合物进一步与抗Hb抗体结合，进行化学发光反应的步骤；本发明进一步包括在含有酶标记抗体或酶标记亲和素的反应步骤中，通过向反应液中加入聚乙二醇以增强抗原与抗体的结合效率和酶催化化学发光反应的效率，大幅度提高了检测方法的灵敏度。
主权项：1.一种非诊断目的的Hb-Aβ复合物的定量检测方法，所述Hb-Aβ复合物来自外周血全血或红细胞裂解液，所述方法，步骤如下：S1：待检样品的制备；S2：向酶标板各孔中加入ProteinG溶液，孵育过夜，冲洗；S3：向酶标板各孔中加入封闭液，孵育2h，冲洗；S4：向酶标板各孔中加入抗Hb抗体溶液，孵育0.5h，冲洗；S5：向酶标板各孔中加入含有Hb-Aβ复合物待检样品，孵育1h，冲洗；S6：向酶标板各孔中加入用PEG-6000溶液稀释的碱性磷酸酶标记的抗Aβ抗体，孵育0.5h，冲洗，加入化学发光液AMPPD并检测其数值；或在S5之后使用步骤S6’：向酶标板各孔中加入生物素标记的抗Aβ抗体，孵育1h，冲洗，加入用含PEG-6000的稀释液稀释的碱性磷酸酶标记的链霉亲和素稀释液，孵育0.5h，冲洗，加入化学发光液AMPPD并检测其数值；其中步骤S2中的ProteinG溶液为用碳酸氢钠缓冲液稀释ProteinG至终浓度为0.001-0.1μgmL；其中PEG-6000的浓度为2-8％（wv）；其中，抗Aβ抗体是特异性识别Aβ42、Aβ40的抗体。
全文数据：
权利要求：
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