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一种高热稳定性高葡萄糖耐受性的β-葡萄糖苷酶突变体及其应用 

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申请/专利权人:河南农业大学

摘要:本发明属于酶工程技术领域,具体涉及一种高热稳定性高葡萄糖耐受性的β‑葡萄糖苷酶突变体及其应用。本发明采用计算机模拟联合回复突变的方法,通过利用一次突变、二次突变、表达、纯化等技术手段,以近暗散白蚁的肠道中的β‑葡萄糖苷酶Bgl8为基础,获得高热稳定性、高葡萄糖耐受性β‑葡萄糖苷酶突变体,该突变体包括476个氨基酸,具有优异的热稳定性以及葡萄糖耐受性,半衰期从49h增加到了110h,提升了2.24倍,催化活性从1.001(kcatKm)增加到了2.914(kcatKm),提高了2.91倍;本发明最终得到的二次突变体葡萄糖耐受性稍有下降,其IC50为1.35molL,但仍满足在实际生产条件下的标准。证明了本发明采用的计算机辅助协同定点突变的方法具有良好的实验可行性和应用前景。

主权项:1.一种高热稳定性高葡萄糖耐受性的β-葡萄糖苷酶突变体,其特征在于,所述突变体包括以β-葡萄糖苷酶为基础,采用突变位点预测进行定点突变得到的一次突变体,和或在一次突变体基础上构建回复突变体库,进行二次突变得到的二次突变体。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 河南农业大学 一种高热稳定性高葡萄糖耐受性的β-葡萄糖苷酶突变体及其应用

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