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一种含烟酰胺磷酸核糖转移酶的发酵液纯化方法及其应用 

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申请/专利权人:国家烟草质量监督检验中心;内蒙古昆明卷烟有限责任公司

摘要:本申请涉及一种含烟酰胺磷酸核糖转移酶的发酵液纯化方法及其应用,属于含烟酰胺磷酸核糖转移酶酶纯化技术领域。所述方法包括如下步骤:1将含有烟酰胺磷酸核糖转移酶的发酵液离心后进行重旋,超声破碎细胞后再次离心,收集上清液;2上清液加入His‑tag在3~5℃共孵育后收集流出液;3流出液依次用低浓度咪唑溶液洗杂、高浓度咪唑溶液洗脱,获得洗脱溶液;4洗脱溶液在3~5℃经透析除去咪唑后,获得纯化的烟酰胺磷酸核糖转移酶;所述低浓度咪唑溶液中咪唑浓度0~25mM,所述高浓度咪唑溶液中咪唑浓度50~250mM。该纯化工艺操作步骤简单,在保证Nampt蛋白提纯纯度的同时,能够兼顾较好的收率,能够明显提高工业生产效益,具有重要的工业应用价值。

主权项:1.一种含烟酰胺磷酸核糖转移酶的发酵液纯化方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:1将含有烟酰胺磷酸核糖转移酶的发酵液离心后进行重旋,超声破碎细胞后再次离心,收集上清液;2上清液加入His-tag在3~5℃共孵育后收集流出液;3流出液依次用低浓度咪唑溶液洗杂、高浓度咪唑溶液洗脱,获得洗脱溶液;4洗脱溶液在3~5℃经透析除去咪唑后,获得纯化的烟酰胺磷酸核糖转移酶;所述低浓度咪唑溶液中咪唑浓度0~25mM,所述高浓度咪唑溶液中咪唑浓度50~250mM。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 国家烟草质量监督检验中心 内蒙古昆明卷烟有限责任公司 一种含烟酰胺磷酸核糖转移酶的发酵液纯化方法及其应用

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