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申请/专利权人：西部(重庆)科学城种质创制大科学中心
摘要：本发明公开了家蚕蛹来源细胞外囊泡的制备方法及其产品和应用，根据差速超速离心方法辅以过滤、超滤等方法进行制备家蚕来源细胞外囊泡，最终获得纯度较高的细胞外囊泡；由于在取材和超速离心配平过程中加入丁羟甲苯可以避免家蚕血浆在后续过程中氧化。同时超离时进行稀释2‑4倍，解决家蚕血液较为粘稠，得率低的问题。综合上述方案解决家蚕来源细胞外囊泡制备过程中血浆氧化，浓度较低，得率低等问题，对现有技术经过改良后，得到了成熟的家蚕来源细胞外囊泡制备方法；制备所得的细胞外囊泡具有抗氧化损伤、促进细胞迁移，以及促进伤口愈合的效果。
主权项：1.家蚕蛹来源细胞外囊泡的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）取化蛹1~3天的蚕蛹体液，然后加入丁羟甲苯溶液，在2~8℃下静置5~15min；（2）将步骤（1）得到的样品进行差速离心，离心条件分别是1000g，4℃，5min；3000g，4℃，5min；10000g，4℃，30min；15wg，4℃，90min；15wg，4℃，90min；（3）取步骤（2）的上清过一次性0.22μm滤膜，除去漂浮大分子物质，收集滤液；（4）将步骤（3）收集的滤液进行超速离心，所述超速离心为先在150000g，4℃下离心120min，沉淀用PBS重悬后，加入丁羟甲苯溶液混匀防止沉淀氧化；再在150000g，4℃下离心90min，收集沉淀，再用PBS重悬。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 西部(重庆)科学城种质创制大科学中心 家蚕蛹来源细胞外囊泡的制备方法及其产品和应用
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