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申请/专利权人：中日友好医院(中日友好临床医学研究所)
摘要：本发明提供了一种半自动测量足细胞足突形态学参数的方法，涉及组织荧光染色和成像技术领域。本发明中所述足突形态学参数包括足突宽度、足突周长、足突面积；所述半自动测量方法包括图像采集、图像重构、足突宽度测量、足突周长面积的测量。本发明的方法进行足细胞足突免疫染色，抗体渗透性和特异性均较好，允许抗体渗透到细胞内从而标记足细胞的足突，能够显示足细胞足突的形态结构和病理形态改变，为足细胞超微形态的研究提供新的技术手段，为临床上病理医师及肾内科医生进行患者个体化诊断、治疗和判断预后提供更加充足的证据。
主权项：1.一种半自动测量足细胞足突形态学参数的方法，其特征在于，所述足突形态学参数包括足突宽度、足突周长、足突面积；所述方法为非诊断目的；所述方法包括如下步骤：图像采集：制备足细胞免疫荧光染色切片，对所述免疫荧光染色切片进行结构光照明成像；图像重构：拍摄成像后的图像，调整参数进行三维超分辨高保真重构；足突宽度测量：在重构后的3D-SIM图像上，使用开源软件FIJI，对成像的单个足突的腰部进行画线，之后通过spiky插件对plotprofile曲线进行高斯拟合，通过findpeaks插件找到画线部位足突的波峰和波谷，最后通过高斯拟合后的曲线测量半高全宽即得该足突的宽度；足突周长面积的测量：在重构后的3D-SIM图像上，使用开源软件FIJI，将图像变为8-bit，而后对图像进行二值化处理，通过调整threshold的灰度选择阈值，选取所有足突部位，在setmeasurements中选择对应参数，通过插件analyzeparticles测量以上参数，读取具体数值；所述足细胞免疫荧光染色切片的制备方法包括如下步骤：对肾组织石蜡切片进行脱蜡、水化后，使用高压热修复处理组织切片5～15min后室温冷却20～30min封闭；依次用一抗、二抗孵育封闭处理后的切片，封片保存；所述高压热修复的缓冲液为pH9.0的Tris-EDTA。
全文数据：
权利要求：
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