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申请/专利权人：湖北医药学院
摘要：本发明涉及分子生物学检测技术领域，具体涉及探针簇、试剂盒及其在检测艰难拟梭菌中的应用，试剂盒包括重组酶介导等温核酸扩增体系、艰难拟梭菌毒素B基因保守序列的扩增引物、四组锁核酸修饰的G‑四链体血红素DNA酶探针与竞争探针。在该方法中，核酸扩增及其与探针杂交均在恒温42℃‑45℃条件下进行，无需对扩增产物进行纯化，且步骤较少、速度快，40分钟内即可完成全部检测。该方法灵敏度高、特异性好、不依赖复杂仪器、结果可用肉眼直接观察，适用于艰难拟梭菌的快速检测。
主权项：1.一种探针簇，用于检测目标基因双链DNA，目标基因包括艰难拟梭菌毒素B保守基因，探针簇包括探针组1、探针组2、探针组3、探针组4中的一种，或探针组1和探针组2，或探针组3和探针组4，或探针组1和探针组3，或探针组2和探针组4；所述探针组1或探针组2或探针组3或探针组4均包括能与目标基因的单链DNA上靠近的两段核酸序列分别互补配对的两个单链探针，每个单链探针的3’端和5’端还分别含有至少2个锁核酸修饰的碱基，每个单链探针上还连接游离的G-四链体序列，两个单链探针与目标基因的单链DNA杂交时，两个单链探针的G-四链体序列相互靠近，能形成G-四链体结构并与血红素结合，从而形成G-四链体血红素DNA酶并催化ABTS2-形成肉眼可见的绿色自由基ABTS·-，两个单链探针未与目标基因的单链DNA杂交时，两个单链探针上各自的游离的G-四链体序列不能相互靠近；探针组1和探针组3分别能与目标基因的同一条单链DNA上连续移位的区域杂交，探针组2和探针组4分别能与目标基因的另一条互补单链DNA上连续移位的区域杂交，探针组1和探针组4、探针组2和探针组3各自的两个单链探针是互补配对的。
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权利要求：
百度查询： 湖北医药学院 一种探针簇、试剂盒及其在检测艰难拟梭菌中的应用
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