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申请/专利权人：浙江康佰裕生物科技有限公司
摘要：本发明涉及细胞制剂检测领域，具体涉及ELISA检测CAR‑T‑NK、TCR‑T等细胞制剂中逆转录病毒残留量的方法。本发明制备得到检测逆转录病毒胞膜蛋白GALV‑env的ELISA试剂盒，该试剂盒包括捕获抗体、检测抗体、GALV‑env蛋白标准品、SA‑HRP、显色液、终止液、酶标板、稀释液和封闭液。该试剂盒可用于检测细胞制剂中逆转录病毒载体的残留量，不同于通过定量逆转录病毒基因组的核酸来检测逆转录病毒载体，本发明通过ELISA测定GALV‑env含量来检测逆转录病毒载体，具有操作简单、快速、灵敏度高等优点。
主权项：1.一种检测GALV-env的ELISA试剂盒，包括捕获抗体、检测抗体、GALV-env蛋白标准品和包被液，其特征在于，所述包被液含有1-2wt%山梨酸酯；捕获抗体为抗GALV-env兔单克隆抗体F8，F8重链的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示，F8轻链的氨基酸序列如SEQIDNO.6所示；所述检测抗体为C9-biotin，由抗GALV-env兔单克隆抗体C9和生物素偶联；C9重链的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示，C9轻链的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示；山梨酸酯的制备中，山梨酸和亚硫酰氯反应制备得到山梨酰氯，然后与4-羟甲基四氢吡喃反应得到山梨酸酯；所述山梨酰氯的制备中使用的催化剂为N,N-二甲基甲酰胺；山梨酸和亚硫酰氯以摩尔比1-5：1-10的比例使用，山梨酰氯和4-羟甲基四氢吡喃以摩尔比1：1-10的比例使用。
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权利要求：
百度查询： 浙江康佰裕生物科技有限公司 一种测定细胞制剂中逆转录病毒载体残留的方法
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