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一种双启动子真核表达报告质粒及其应用 

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申请/专利权人:中国药科大学

摘要:本发明公开一种双启动子真核表达报告质粒及其应用,本发明基于荧光素酶蛋白片段互补分析技术构建了一种双启动子真核表达报告质粒,在双启动子真核表达载体pBudCE4.1上插入Flag‑hGLucN‑mGSDMD融合蛋白的编码序列和HA‑hGLucC‑mGSDMD融合蛋白的编码序列,可同时表达两种目标融合蛋白。本发明将该双启动子真核表达报告质粒成功应用到基于GSDMD依赖型焦亡机制的抗焦亡药物的筛选中,通过对GSDMD活性片段GSDMD‑N的寡聚化程度进行检测,评价药物的焦亡抑制活性,建立了一种基于GSDMD依赖型焦亡机制的抗焦亡活性药物的筛选方法。

主权项:1.一种双启动子真核表达报告质粒,其特征在于,所述双启动子真核表达报告质粒以pBudCE4.1为基础质粒,包含Flag-hGLucN-mGSDMD融合蛋白的编码序列和HA-hGLucC-mGSDMD融合蛋白的编码序列,所述Flag-hGLucN-mGSDMD融合蛋白的编码序列克隆入pBudCE4.1的EF-1α多克隆位点,所述HA-hGLucC-mGSDMD融合蛋白的编码序列克隆入pBudCE4.1的CMV多克隆位点,所述双启动子真核表达报告质粒能够同时表达Flag-hGLucN-mGSDMD融合蛋白和HA-hGLucC-mGSDMD融合蛋白。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国药科大学 一种双启动子真核表达报告质粒及其应用

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