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一种SGIV病毒的RPA-CRISPR-Cas12a检测方法及其应用 

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申请/专利权人:华南农业大学

摘要:本发明公开了一种SGIV病毒的RPA‑CRISPR‑Cas12a检测方法及其应用。该试剂盒包括RPA引物对、crRNA、ssDNA‑FQ报告探针,所用的引物探针组能特异扩增并靶向目标序列,与其他病毒不存在交叉反应,提高SGIV检测的特异性。设计的ssDNA‑FQ报告探针,利用LbCas12a的反式切割活性,将ssDNA‑FQ进行切割产生荧光信号,可将检测结果可视化。此外,将RPA和CRISPR‑Cas12a联合构建SGIV的检测方法,极大提高了检测灵敏度,达到10copiesμL。本发明的SGIV检测方法特异性好、灵敏度和准确度高及适用性强,可快速地检测SGIV,具有较高的现场应用前景。

主权项:1.一种利用RPA-CRISPR-Cas12a检测石斑鱼虹彩病毒SGIV的检测试剂盒,其特征在于,包括检测SGIV的特异性RPA引物对、crRNA、荧光报告探针和Cas12a酶,所述RPA引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的上游引物和核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的下游引物;所述crRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。

全文数据:

权利要求:

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