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申请/专利权人:华南农业大学
摘要:本发明公开了一种以香椿下胚轴为外植体的一步再生方法,包括如下步骤:S1.选取香椿无菌苗的下胚轴为外植体,接种到不定芽诱导培养基上,诱导愈伤组织并分化形成不定芽;S2.将步骤S1中的诱导出不定芽芽点的愈伤组织切块转接于不定芽增殖培养基中进行增殖培养,S3.切取步骤S1或S2中的单个不定芽接种于生根培养基中诱导生根,形成再生苗。本发明通过大量实验去摸索和明确再生参数,建立了香椿以下胚轴为外植体的高效再生体系及获取移栽的成活植株,不仅为香椿的优质资源保存、扩繁及遗传转化的提供一套技术支持,而且利于该再生体系的应用和推广,并且与以其它香椿组织为外植体的再生体系相比,操作更简洁、高效。
主权项:1.一种以香椿下胚轴为外植体的一步再生方法,包括如下步骤:S1.选取香椿无菌苗的下胚轴为外植体,接种到不定芽诱导培养基上,诱导愈伤组织并分化形成不定芽;S2.将S1中分化出不定芽的愈伤组织切块转接至不定芽增殖培养基进行增殖培养;S3.将步骤S1或步骤S2中培养形成的不定芽分切出单芽,并接种到生根培养基中诱导生根,形成再生苗,进行移栽培养;所述的不定芽诱导培养基组成为:0.75mgLZT、0.2mgLIAA、0.1mgL2,4-D、20~30gL蔗糖、5.0~8.0gL琼脂,余量为MS,pH为5.8~6.2;所述的不定芽增殖培养基组成为:0.5mgL6-BA、0.1mgLIBA、20~30gL蔗糖、5.0~8.0gL琼脂,余量为34MS,pH为5.8~6.2;所述的生根培养基组成为:1.0mgLIBA、20~30gL蔗糖、5.0~8.0gL琼脂,余量为12MS,pH为5.8~6.2。
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