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申请/专利权人:中国医学科学院药用植物研究所
摘要:本发明属于中药有效成分提取及医药应用技术领域,具体涉及一种枸杞多糖及其提取方法与应用。本发明通过水提醇沉法从枸杞中提取枸杞多糖Lyciumbarbarumpolysaccharides,LBP,经Sevag法除蛋白,D101大孔树脂脱色及DEAE‑52纤维素柱分离得到高纯度的枸杞多糖LBP‑1,并过HPLC和GPC分别测定LBP‑1的单糖组成及相对分子质量。以小鼠单核巨噬细胞RAW264.7为模型,对LBP‑1的体外抗炎活性进行研究;以溃疡型结肠炎小鼠为模型,研究LBP‑1的体内抗炎活性,并考察LBP‑1与美沙拉嗪5‑ASA联合给药后对肠道损伤的影响。经实验研究表明,LBP‑1具有良好的体内外抗炎活性,且与5‑ASA联合给药可达到增效减毒的作用,为枸杞中多糖的提取分离及抗炎活性研究奠定了基础,为结肠炎的进一步给药治疗提供了新的策略,具有极大的应用前景。
主权项:1.一种枸杞多糖的提取方法,其特征在于,所述方法具体包括如下步骤:1取枸杞粉碎后用95%乙醇脱脂,干燥称重;用煎药锅热水浸提,重复提取后纱布过滤,合并滤液,减压浓缩;经95%乙醇沉淀后干燥称重,得LBP粗多糖;2将步骤1制备的LBP粗多糖溶液用Sevag试剂重复多次操作除去蛋白直至白色中间层消失;收集上清液,浓缩,冷冻干燥得去蛋白LBP;将除蛋白后的LBP溶液用D101大孔吸附树脂除色素,随后取洗脱液旋蒸浓缩,冻干,得脱色LBP;3称取100mg步骤2制备的脱色LBP溶于10mL蒸馏水中,充分溶解后5000rmin离心10min取上清液;经DEAE-52纤维素柱层析,依次用蒸馏水、0.1moLLNaCl、0.2moLLNaCl、0.5moLLNaCl进行洗脱分别得到LBP-1、LBP-2、LBP-3、LBP-4,洗脱流速为2mLmin,每管收集10mL;收集洗脱液,隔管采用苯酚-硫酸法检测,以管数为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制洗脱曲线;依据洗脱曲线,将同一洗脱峰的洗脱液进行合并,减压浓缩,冷冻干燥,得四种不同分子量的精制LBP。
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