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申请/专利权人:江苏科技大学
摘要:本发明公开了一种耐高温的谷氨酸脱羧酶及其制备方法与应用,属于基因工程技术领域。所述的谷氨酸脱羧酶基因序列见SEQIDNO.2。本发明基于GABA高产菌株‑希氏乳杆菌GL1的全基因组解析,获得希氏乳杆菌的谷氨酸脱羧酶基因序列,并将基因克隆至pET28a表达载体上,在大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达,得到可溶性的重组谷氨酸脱羧酶蛋白。通过镍柱亲和层析、TEV蛋白酶消化、镍柱亲和层析、尺寸排阻色谱,制备较高纯度的谷氨酸脱羧酶。该酶最适温度为60℃,最适pH为4.4;在40~70℃和pH4.0~5.2范围内酶活力较高,其酶活力均保持80%以上。该酶具有较好的温度和pH稳定性,可用于γ‑氨基丁酸工业化生产应用。
主权项:1.一种耐高温的谷氨酸脱羧酶,其特征在于,所述耐高温的谷氨酸脱羧酶来源于希氏乳杆菌,其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示;所述耐高温的谷氨酸脱羧酶的最适酶活温度为60℃,在40~70℃下,相对酶活力均保持80%以上,30℃时,相对酶活力均保持60%以上;最适pH为4.4,pH4.0~5.2内,酶活力保持80%以上。
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权利要求:
百度查询: 江苏科技大学 一种耐高温的谷氨酸脱羧酶及其制备方法与应用
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